[发明专利]一种交联固定化脂肪酶-高分子材料复合物的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种交联固定化脂肪酶-高分子材料复合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1，高分子材料醛基化

向有机试剂A中加入高分子材料，待溶解完全后加入氧化剂，醛基化反应4-48h后，浓缩反应液至原体积的10%，再向浓缩后的反应液中加入有机试剂B，过滤并洗涤烘干沉淀物，即得醛基化高分子材料；

步骤2，步骤2，醛基化高分子材料修饰脂肪酶

向缓冲液中加入脂肪酶和醛基化高分子材料，室温下搅拌反应0.5-8h，再加入还原剂，继续反应10-40h，得含有脂肪酶-高分子材料复合物的溶液；

步骤3，交联固定化脂肪酶-高分子材料复合物

向含有脂肪酶-高分子材料复合物的溶液中加入有机试剂C，室温搅拌后，加入牛血清白蛋白，继续搅拌5 -240min后，再加入戊二醛溶液进行交联，持续搅拌30 min-48 h，加入赖氨酸溶液，继续搅拌30 min-48 h，离心后，用蒸馏水清洗沉淀物，干燥即得固定化脂肪酶-高分子材料复合物。

2.根据权利要求1所述的一种交联固定化脂肪酶-高分子材料复合物的制备方法，其特征在于，步骤1中有机试剂A为二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷或三氯甲烷中一种或多种混合而成；有机试剂B为石油醚、乙醚或正己烷中一种或多种混合而成；高分子材料为Pluronic®F-127、Pluronic®F-68、Pluronic®P-123、Pluronic®L-81、Pluronic®L-31或含有羟基的高分子化合物中的一种或多种混合而成；氧化剂为戴斯-马丁氧化剂、二氧化锰、氯铬酸吡啶、重铬酸吡啶鎓或三氧化铬中一种或多种混合而成。

3.根据权利要求1所述的一种交联固定化脂肪酶-高分子材料复合物的制备方法，其特征在于，步骤2中脂肪酶为南极假丝酵母脂肪酶B、褶皱假丝酵母脂肪酶、猪胰脂肪酶、米曲霉脂肪酶、假单胞菌属脂肪酶、嗜热栖热菌脂肪酶、米根霉脂肪酶或黑曲霉脂肪酶；缓冲液为磷酸缓冲液，浓度为10-200 mmol/L；pH值为6-9；还原剂为硼氢化钠或氰基硼氢化钠。

4.根据权利要求1所述的一种交联固定化脂肪酶-高分子材料复合物的制备方法，其特征在于，步骤3中有机溶剂C为异丙醇、甲醇、乙醇、丙酮、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或乙腈中一种或多种混合而成；戊二醛的体积分数为50%，添加量为20 μL-200 mL；赖氨酸的摩尔浓度为1 mol/L，添加量为20 μL-200 mL；离心的转速为4000-15000 rpm，离心时间为3-60 min；干燥为冷冻干燥、真空干燥、喷雾干燥或自然风干。

5.基于权利要求1所述的固定化脂肪酶-高分子材料复合物在制备去污剂、分解油脂、制备生物柴油、拆分手性异构体、合成高聚物、去除纸浆中的树脂或皮革脱脂中的应用。