[发明专利]一种HLA-0201限制性PADI4表位多肽及其应用

说明书

本发明涉及生物医学领域，尤其涉及一种HLA‑0201限制性PADI4表位多肽及其应用，本发明提供一种HLA‑0201限制性PADI4表位多肽，其氨基酸序列选自下述(a)‑(c)：(a)YLTGVEISL，即SEQ ID NO.1；(b)CLEEKVCSL，即SEQ ID NO.2；(c)ELLKRELGL，即SEQ ID NO.3。根据本发明，编码所述PADI4表位多肽的基因，包含PADI4表位多肽基因的表达载体。本发明的HLA‑0201限制性PADI4表位多肽与HLA‑0201具有强亲合力，对其免疫原性进行评价，发现其可以在HLA‑0201阳性健康人外周血中诱导出特异性的、HLA‑0201限制性的细胞毒T淋巴细胞，而且是一个被细胞自然加工、递呈的免疫原性多肽。HLA‑0201限制性PADI4表位多肽诱导的抗原特异的细胞毒T淋巴细胞具有高杀伤活性和高IFN‑γ分泌能力。

技术领域

本发明涉及生物医学领域，尤其涉及一种HLA-0201限制性PADI4表位多肽及其应用。

背景技术

在哺乳动物中，肽基精氨酸去亚胺基酶家族一共有5个成员，分别是PADI1、2、3、4和6，它们都具有去亚胺基酶活性，能以依赖于Ca2+离子的方式将精氨酸转化为瓜氨酸，其中PADI1、2、3和6主要分布在细胞质中，而PADI4在N端含有核定位信号，主要分布于细胞核中，这也是它参与组蛋白修饰的前提条件，PADI4另一个不同之处在于它能够将单甲基化的精氨酸转化为瓜氨酸，多余的亚胺基和甲基以氨基甲烷(NH2CH3)的形式除去。PADI4对H2A，H3，H4三种组蛋白具有催化活性，对H2A和H4的修饰位点位于第三位的精氨酸上，并且这两个位点具有SGRGK的序列保守性；而对H3的修饰位点较多，包括：H3R2、R8、R17和R26，它们并不具有序列上的保守性。其中H3R8、H3R17以及H4R3是PADI4在体内的主要作用位点。PADI4对组蛋白H3上精氨酸的修饰会抑制激素受体介导基因的转录，当激素刺激引起基因转录下调时，PADI4会被募集到pS2基因的启动子上，并引起H3上相应位点的去亚胺基化，这种修饰会阻止CARM1对H3精氨酸的催化，后者被认为是激素介导基因转录所必需的，PADI4就是通过去亚胺基化作用拮抗了CARM1，从而抑制了转录的进行。PADI4在各种恶性肿瘤组织中有很高的表达，尤其是在各种腺癌。Westernblot和抗瓜氨酸化蛋白抗体的免疫组化也证实了PADI4在肿瘤癌细胞中的表达。

因此，如果以PADI4为靶标，对机体进行免疫，将会使机体产生针对PADI4蛋白的特异性免疫应答，从而使机体能有效地抑制、清除肿瘤细胞，为相关肿瘤的预防及治疗提供措施。

合成肽疫苗是近年来随着分子生物学及免疫学的进展而发展起来的一种新的疫苗，可以诱导机体产生特异性的免疫应答，而且其副作用轻微、安全性好，是目前疫苗研究的一个新的方向，广泛应用与抗肿瘤及抗病毒免疫治疗，己有证据表明，合成肽能直接与MHC-I类分子结合，而不需要APC的加工、处理，它和天然的内源性肽在激活免疫系统方面具有同等的效力。多肽疫苗己成为目前抗恶性肿瘤的一项新策略，也是目前研究最多的肿瘤治疗性疫苗。

尽管在研究肿瘤特异性肽疫苗方面已取得了重大的进步，但由于目前已鉴定出来的T细胞表位十分局限，主要集中在HLA-A2，缺少A33、A24、A11限制性表位。而随着人种的不同，其HLA-I类分子呈现多态性，除A2外，A33、A24、A11也占据了很大的比重。HLA-0201是一种在我国人群中具有较高分布的一种MHC-I类分子。因此，鉴定新的HLA限制性的肿瘤抗原显得极为必要和重要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种HLA-0201限制性PADI4表位多肽及其应用，以解决上述技术问题。

本发明为解决上述技术问题，采用以下技术方案来实现：

第一方面，本发明提供一种HLA-0201限制性PADI4表位多肽，其氨基酸序列选自下述(a)-(c)：

(a)YLTGVEISL，即SEQ ID NO.1；