[发明专利]生物纳米硒产生菌及利用该菌株制备生物纳米硒的方法

说明书

本发明公开了生物纳米硒产生菌及利用该菌株制备生物纳米硒的方法，涉及纳米生物材料领域，基于利用传统物理‑化学方法制备纳米硒容易对环境造成危害，生产的纳米硒理化性质不稳定，生物纳米硒产生菌对亚硒酸钠的耐受性不高，使其应用受到限制的问题而提出的，本发明从富硒农业土壤中分离筛选出一株可耐受较高浓度亚硒酸钠的芽孢杆菌Se8，利用芽孢杆菌Se8合成生物纳米硒，本发明的有益效果在于：对设备要求低，工艺简单，成本低，产物纯度高，环境友好，克服了传统物理、化学方法制备纳米硒易引入杂质，能耗高，产物粒径分布不均匀的缺点。

技术领域

本发明涉及纳米生物材料领域，具体涉及一种生物纳米硒产生菌及利用该菌株制备生物纳米硒的方法。

背景技术

硒是人和动物必需的微量元素之一，与机体的抗氧化能力、免疫功能、抗病毒、抗癌作用等有着重要关系。与无机硒和有机硒相比，红色纳米硒具有毒性低、生物活性高等特征，在动物生产、医药及保健品方面有着广泛的应用。同时，纳米硒兼具纳米材料的光电子特性以及多种抗生物活性，因此在生物传感器制备，太阳能电池、整流器、静电复印等等方面也具有广阔的应用前景。目前纳米硒的合成主要通过化学反应，结晶技术，反向胶束法等技术生成。但这些技术会受到高温、高压、催化剂等条件限制，而且容易对环境造成危害，生产的纳米硒在没有保护剂存在的条件下，容易团聚，理化性质不稳定，常温下就容易失去生物活性，而转变成灰黑色晶型的单质硒。因此，生产上亟需一种清洁，无毒，环保的方法来生产稳定的纳米硒。

微生物在硒的自然界中的循环发挥着重要作用。已发现许多细菌，如大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、红螺菌(RhodospirillumMolisch)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)等可将氧化态硒还原为无毒、高效的红色纳米硒，而且合成的生物纳米硒性质稳定，活性高，故利用细菌合成生物纳米硒，是硒的高效生物转化方式，也是降低硒环境风险的解决方式之一。但是，目前报道和应用的细菌，对亚硒酸钠的耐受性普遍不高(最大硒耐受浓度≤100mM)，导致其应用于实际生产中时受到一定限制。因此，筛选可以耐受更高浓度亚硒酸钠的微生物，并利用该微生物生产生物纳米硒，对于推进生物纳米硒合成产业的发展，具有重要意义。

发明内容

本发明解决的技术问题在于利用传统物理、化学方法制备生物纳米硒容易对环境造成危害，生产的纳米硒理化性质不稳定，生物纳米硒产生菌对亚硒酸钠的耐受性不高，使其应用受到限制。

本发明是采用以下技术方案解决上述技术问题的：

本发明提供一株生物纳米硒产生菌，分类命名：芽孢杆菌Se8(Bacillus.sp)，保藏编号： CCTCC M 2018422，保藏日期：2018年7月2日，保藏单位：中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山。

本发明还提供利用生物纳米硒产生菌制备生物纳米硒的方法，包括以下步骤：

(1)芽孢杆菌Se8(Bacillus.sp)的培养：挑取芽孢杆菌Se8(Bacillus.sp)单菌落至 YEP培养基中进行恒温振荡培养；

(2)诱导剂的添加：向步骤(1)的培养产物中，加入诱导剂，使诱导剂终浓度为 1-3mg/L，继续恒温振荡培养；

(3)亚硒酸钠的添加：向步骤(2)的培养产物中，添加浓度为5mol/L的Na₂SeO₃溶液，调节Na₂SeO₃终浓度为0.1-0.5mol/L，继续恒温振荡培养；