[发明专利]检测水稻耐低温基因COLD1基因型的dCAPS标记及应用有效
| 申请号： | 201811338846.0 | 申请日： | 2018-11-12 |
| 公开（公告）号： | CN109251996B | 公开（公告）日： | 2022-03-25 |
| 发明（设计）人： | 储黄伟;曹黎明;程灿;涂荣剑;周继华;牛付安;孙滨;杨佳;胡雪娇 | 申请（专利权）人： | 上海市农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 浙江千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人： | 黎双华 |
| 地址： | 201106 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 检测 水稻 低温 基因 cold1 基因型 dcaps 标记 应用 | ||
【权利要求书】：
1.检测水稻耐低温基因
dcaps-F：5'-CCGTCAATCTGCCTTACAGCTATCTGTCAC-3'，
dcaps-R：5'-TGAGCTGCCTTTCCAATGTTTTGAAGGCC-3'。
2.检测水稻耐低温基因
（1）以待测样本的基因组DNA为模板，利用dCAPS标记通过PCR方法扩增目标序列；所述dCAPS标记的序列为：
dcaps-F：5'-CCGTCAATCTGCCTTACAGCTATCTGTCAC-3'，
dcaps-R：5'-TGAGCTGCCTTTCCAATGTTTTGAAGGCC-3'；
PCR反应程序如下：94℃，5min；94℃，30s，60℃，30s，72℃，30s，35个循环；72℃，10min；
（2）利用限制性内切酶StuI对扩增产物进行酶切，再对酶切产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，然后用硝酸银染色检测；
（3）根据电泳结果判定
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