[发明专利]用于筛查食管癌癌前病变的蛋白质芯片、筛查试剂盒及其应用

说明书

本发明涉及一种新的筛查人食管癌癌前病变的蛋白质芯片、筛查试剂盒及其应用。该蛋白质芯片包含了16种特定人蛋白质的蛋白斑点，使用该蛋白质芯片可以检测来自被检人的样品中这16种蛋白质各自相应抗体的存在和/或存在，联合分析这16种蛋白质的相应抗体的检测结果，可以判断被检人是否存在食管癌癌前病变。本发明进一步提供了该蛋白质芯片在健康人群或高危人群中筛查食管癌癌前病变的应用。

技术领域

本发明涉及一种用于癌症筛查和/或早期诊断的蛋白质芯片，以及由此蛋白质芯片衍生的筛查试剂盒。具体而言，本发明提供了用于筛查食管癌癌前病变的蛋白质芯片和由此蛋白质芯片衍生的筛查试剂盒及其在健康人群或高危人群中进行食管癌癌前病变的筛查和/或早期诊断中的应用。

背景技术

食管癌是人类常见肿瘤之一，发病率高、死亡率高，目前食管癌的五年死亡率仍然在90％以上，严重威胁着人类的生命健康。食管癌死亡率高的最重要的原因是食管癌的诊断率低，早期食管癌病人无明显体征，因而到医院就诊的病人绝大多数是中晚期病人。食管癌的发生、发展具有明显的阶段性，通常经历食管炎、食管鳞状上皮不典型增生(包括轻中重三级不典型增生)、原位癌，最终发展为浸润癌。食管鳞状上皮不典型增生是食管癌的癌前病变，这一阶段称之为食管癌发生的癌前阶段。将食管癌癌前病变患者从人群中筛查出来，进行干预性治疗可以将食管癌的发生阻断在癌前阶段，这对于提高食管癌的治愈率及降低死亡率具有重大意义。

目前常用的食管癌癌前病变的诊断技术包括中国食管气囊拉网脱落细胞检查、日本海绵球拖拉脱落细胞检查、胃液隐血检测技术、食管镜检查及食管粘膜碘染色。

二十世纪五十年代末，河南医科大学首先开展了应用“双腔管带网气囊”进行食管拉网脱落细胞学检查。1993年的一组204个病例的报告显示，依据食管拉网细胞学筛查发现和诊断的早期癌手术切除后5、10和25年的生存率分别为92.6％、71.6％和48.0％，效果令人满意。但在普查过程中发现该技术也存在诸多问题。1972到1996年间，在我国食管癌高发区进行的多次共71890人的普查中，食管拉网脱落细胞学检查对食管癌重度不典型增生的检出率在1％-10％之间，差别较大。造成这一问题的原因可能是由于该技术受到拉网操作医生、细胞病理学医生的水平，诊断标准等多因素的影响。1980年后，随着食管内镜技术的普及，发现拉网细胞学检查的敏感性低，漏诊率高。1995年和2002年两次对437人和742人的食管拉网细胞学检查与食管镜及食管粘膜碘染色检查的双盲对比研究发现，食管拉网细胞学检查对不典型增生的敏感性分别为33.6％和30.3％，即有接近70％的患者被漏诊。而且由于食管拉网过程太痛苦，患者的接受率越来越低。

日本海绵球拖拉脱落细胞检查与食管拉网相比，具有操作简单，受检者痛苦少，接受率效率高的优点。但是，但食管上皮脱落细胞收集率低，效果差，敏感性低。一组460例45-65岁高发区的自然人群，每人连续3项三盲检查，先海绵球，然后食管拉网，最后内镜检查(术中加碘染色)，三者最后确诊为食管者分别为0例、11例、23例，可见日本海绵球拖拉脱落细胞检查普查应用价值不大。

由于吞咽食物和食管蠕动的摩擦，使食管粘膜表面脆弱的病灶易受到损伤并导致病变细胞的脱落和出血。这些细胞和血液可随食物或唾液流入胃内，存入胃液。按此设想，秦德兴设计了胃隐血检测筛查法。在一个速溶胶囊内装棉球，胶囊在胃液中溶化释放棉球，棉球吸附1ml的胃液，拿出体外进行潜血试验。魏德兴报告一组4970例胃液隐血检测，(++)和(+++)阳性者共372例，其中284例接受内镜检查，21例诊断为食管癌。对食管癌的敏感度52.5％，特异度74.9％，漏诊率47.5％，不能检测出食管癌癌前病变。形若齐设计的一组隐血试验和内镜检查的双盲试验(495例)，证明胃隐血检测筛查法对食管癌的敏感度21.3％，特异度90.2％，癌漏诊率达78.7％，对癌前病变的检出率为0。陆建邦1994年对476人的检查结果认为该方法对食管癌及其癌前病变的漏诊率为100％。由于胃隐血检测筛查法的灵敏度低漏诊率高，对食管癌及其癌前病变没有筛查的价值。