[发明专利]一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法

权利要求书

1.一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）将黄姑鱼鱼鳞加入氢氧化钠溶液中，搅拌5-10h，取出后用水洗净；

2）将清洗后的黄姑鱼鱼鳞浸入盐酸溶液中浸泡脱钙20-40min，滤去酸液，向鱼鳞中加入鱼鳞重量10-20%的吸附剂搅拌混合均匀，静置吸附6-8h，用水洗净，干燥粉碎；

3）将干燥粉碎后的鱼鳞按质量比1:35-50加入水中，搅拌混合均匀，加入木瓜蛋白酶在40-45℃下进行酶解10-15h，酶解完成后置于沸水中进行灭活5-10min，冷却至室温，以12000-13000r/min转速进行离心25-30min，收集上清液；

4）将上清液依次进行超滤、纳滤浓缩处理，然后经过冷冻干燥，即得；

所述步骤2）中吸附剂的制备方法包括以下步骤：

将预处理蟹壳粉置于质量浓度为5-10%醋酸水溶液中浸泡2-5h，水洗至中性，烘干，将烘干后的蟹壳在惰性气体的吹扫下，先以3-4℃/min升温速率升温至300-350℃，焙烧30-50min，然后以6-8℃/min升温速率升温至600-650℃，焙烧1-3h，得到多孔蟹壳粉；将多孔蟹壳粉加入高锰酸钾水溶液中进行活化20-40min，水洗后分离，干燥；将活化后的多孔蟹壳粉添加到海藻酸钠水溶液中，多孔蟹壳粉与海藻酸钠的质量比为1:0.4-0.6，然后加入三偏磷酸钠进行反应1-2h，三偏磷酸钠与海藻酸钠的质量比为1:3-6，经过分离、干燥得到吸附剂。

2.根据权利要求1所述的一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法，其特征在于，所述步骤1）中氢氧化钠的浓度为0.5-2wt%。

3.根据权利要求1所述的一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法，其特征在于，所述步骤2）中盐酸溶液的摩尔浓度为0.2-0.5mol/L，鱼鳞与盐酸的质量体积比为1:5-10 g/mL。

4.根据权利要求1所述的一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法，其特征在于，所述步骤3）中木瓜蛋白酶的添加量为鱼鳞重量的3-6%。

5.根据权利要求1所述的一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法，其特征在于，所述高锰酸钾水溶液的浓度为0.5-2wt%。

6.根据权利要求1所述的一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法，其特征在于，所述海藻酸钠水溶液的浓度为1-5wt%。

7.根据权利要求1所述的一种日本黄姑鱼鱼鳞免疫调节肽的制备方法，其特征在于，所述预处理蟹壳粉的制备方法包括以下步骤：

将蟹壳粉碎后得到蟹壳粉，将蟹壳粉与多巴胺按质量比1:0.25-0.5加入水中，蟹壳粉与水的质量体积比为1:30-40g/mL，升温至45-60℃，然后加入戊二醛，戊二醛与多巴胺的摩尔比为1:1-2，搅拌反应1-2h，搅拌速率控制在80-120r/min，经过过滤、水洗后将蟹壳粉在50-70℃下干燥1-4h，得到预处理蟹壳粉。