[发明专利]一种同时测定玄参中10种核苷类成分的方法

权利要求书

1.一种同时测定玄参中10种核苷类成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)制备对照品溶液；

2)制备供试品溶液：取玄参粉末1.0g，精密称定，置于25ml具塞锥形瓶中，加入10ml超纯水，室温下超声处理45min，过滤，滤液于12000r/min离心取上清液，过0.45μm微孔滤膜，得供试品溶液；

3)取步骤1)中的对照品溶液，在确定的色谱-质谱条件下测定，以对照品的峰面积对相应的浓度进行线性回归，得回归方程、相关系数和线性范围；

4)取步骤2)中制得供试品溶液，在同样的色谱-质谱条件下，进行线性回归，得回归方程、相关系数和线性范围；将对照品的数据与实验溶液的数据进行对比分析。

2.根据权利要求1所述的一种同时测定玄参中不同核苷类成分的方法，其特征在于，所述步骤2)中选择水作溶剂，以超声提取，料液比为1∶10，提取时间为45min。

3.根据权利要求1所述的一种同时测定玄参中不同核苷类成分的方法，其特征在于，所述步骤1)中配制对照品溶液的具体操作为：

称取尿嘧啶、鸟嘌呤、次黄嘌呤、尿苷、腺嘌呤、肌苷、鸟苷、2′-脱氧鸟苷、腺苷、2′-脱氧腺苷对照品适量，加纯水配制成质量浓度分别为213.00、168.00、160.00、1011.00、190.00、156.00、1042.00、66.00、414.00、91.50μg/ml的对照品储备液；取各对照品储备液适量，加水定容至10ml制成混合对照品溶液，并逐级稀释，得到一系列不同浓度的核苷混合对照品溶液，以0.45μm微孔滤膜滤过，待用。

4.根据权利要求1所述的一种同时测定玄参中不同核苷类成分的方法，其特征在于，所述步骤3)中的色谱-质谱条件具体为：

色谱条件：色谱柱：WatersAtlantisT₃(2.1mm×150mm，3μm)；流动相：甲醇(A相)-5mmol/L醋酸铵(含0.1％冰醋酸，B相)；梯度洗脱：0～4.5min，3％～4％A；4.5～8min，4％～18％A；8～10min，18％A；10～10.1min，18％～3％A；10.1～13min，3％A。柱温35℃，流速0.4ml/min，检测波长254nm，进样量2μl；

质谱条件：离子源：TurboV，电离模式：(ESI⁺)；采集方式MRM；离子化温度(TEM)：650℃。喷雾电压：5500V；雾化气(GS1)：65L/min；辅助气(GS2)：65L/min；气帘气(CUR)：30L/min。