[发明专利]一种病理组织透明脱蜡液及其制备方法

说明书

本发明涉及一种新型的病理组织透明脱蜡液及其制备方法，该新型的病理组织透明脱蜡液包括如下质量份数的组份：中长链饱和脂肪酸酯：85‑100份，丙二醇类醚：0‑25份。还包括如下质量份数的植物精油：0‑1份。所述中长链饱和脂肪酸酯由C原子数不小于8的中长链酸与2‑8个碳原子的直链醇酯化所得。该新型的病理组织透明脱蜡液，可与乙醇等脱水剂、石蜡等填充剂混溶，且毒性小、作用效果较温和，不仅不易引起组织变形、硬化，有利于得到透明脱蜡效果较好的组织切片染色样本，且不会对组织细胞结构和组织细胞内其他成分以及组织抗原造成破坏，符合临床病理诊断和研究所要求优质染色片的要求，同时也符合实验室环保的要求。

技术领域

本发明涉及病理学组织切片技术领域，尤其涉及一种病理组织透明脱蜡液及其制备方法。

背景技术

石蜡切片是在观察组织形态和免疫组化等定性分析中最常用的一种切片技术，被广泛的应用于临床病理诊断和实验研究中。在病理组织处理过程中，组织经固定、脱水后，需要经过一种既能与乙醇相混合，又能溶解石蜡的溶剂处理，以便通过其媒介作用，使石蜡浸入组织块。在此过程中组织中的水分被溶剂取代，使得其折射指数接近组织蛋白的折射指数，以得到透明组织块。组织经石蜡包埋后制成蜡块，用切片机制成切片后，需要将切片中的蜡脱去才能进行染色。

目前最常用的组织透明脱蜡液主要是二甲苯，二甲苯在病理科手工制片、自动脱水机及自动染色机上均大量使用。虽然二甲苯具有良好的脱蜡和透明效果，但是却存在以下缺陷：(1)二甲苯属于具有强烈刺激性气味的神经毒素，麻痹中枢神经和植物神经，并刺激粘膜，对长期接触的人员生理系统具有选择性的特殊伤害；(2)长期使用还可引起免疫功能低下、贫血、皮炎、湿疹和皮肤干燥等症状，对病理工作人员的身体健康产生严重危害，也对环境造成一定的污染。(3)在病理组织处理过程中，使用二甲苯容易使得病理组织收缩、硬化。

为此，寻找二甲苯的替代品已经成为当前亟待解决的问题，目前已有部分二甲苯的替代品用于人体及动植物组织标本的透明和石蜡包埋的实验研究，例如专利(CN91108571.8；CN200910050030.2和CN201110023746.0)配方中皆使用松节油作为组织染色后透明，这些透明剂只有透明作用，无脱蜡作用。专利(USP7,070,951)配方中采用醇类与柠檬烯的混合物，辅以表面活性剂脱蜡；醇类本身脱蜡效果很差，会造成组织过度脱水，使标本发收缩、硬化、脆裂。此外，亦有用短链烷烃或支链烷烃做脱蜡剂，短链烷烃的缺点是气味强烈，沸点低，在环境中迅速弥散，对水质污染严重，因此对人体和环境均可能造成危害，因此不是理想的二甲苯替代品。

在CN106053187A生物组织样本切片染色套液，本发明公开了一种生物组织样本切片染色套液，包括：切片脱蜡液包括：D柠烯、甲基环己烷和表面活性剂；苏木素助染液包括：表面活性剂和饱和柠檬酸溶液；苏木素染色液包括：苏木素、无水乙醇、纯化水、高碘酸、丙三醇、柠檬酸和硫酸铝钾；分化液包括：无水乙醇、纯化水和盐酸；蓝化液包括：纯化水和氢氧化钾水溶液；伊红染色液包括：水溶性伊红、纯化水、无水氯化钙和盐酸水溶液；切片透明液包括：D柠烯、异丙醇和表面活性剂。发明设计的染色套液不仅可以满足各级医院病理科及科研院所对组织样本处理中对环保型病理学组织学试剂的要求，而且可满足常规病理诊断、免疫组织化学诊断技术、分子生物学诊断技术的要求，处理组织的效果优于传统技术。但是本申请采用的组份过多，在操作复杂的同时，还可能会造成组织损坏。

发明内容

本发明为了弥补现有技术的不足，提供了一种成分简单、效果良好、毒性低、能够生物降解的病理组织透明脱蜡液，主要用于病理组织处理过程中脱水后的透明或病理切片染色封片前的脱蜡透明，解决了现有技术中存在的问题。

本发明为解决上述技术问题所采用的技术方案是：

一方面，一种病理组织透明脱蜡液，包括如下质量份数的组份：中长链饱和脂肪酸酯：85-100份，丙二醇类醚：0-25份。

优选的，中长链饱和脂肪酸酯：92份，丙二醇类醚：12.5份。