[发明专利]一种模拟人精卵巢综合征的Sissy青鳉模型的建立方法有效
| 申请号： | 201811346983.9 | 申请日： | 2018-11-13 |
| 公开（公告）号： | CN111172189B | 公开（公告）日： | 2023-06-13 |
| 发明（设计）人： | 关桂君;徐疏梅 | 申请（专利权）人： | 上海海洋大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;A01K61/10;A01K67/027 |
| 代理公司： | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人： | 巫蓓丽 |
| 地址： | 201306 上海市*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 模拟 人精 卵巢 综合征 sissy 模型 建立 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种模拟人精卵巢综合征的Sissy青鳉模型的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：
a)利用gsdf特异引物，选育得到gsdf敲除的纯合子雌性种鱼gsdfKO雌性青鳉(XYgsdf-/-♀)；
b)利用晶状体绿色荧光，分选出Tg:cryGsdf2A-EGFP转基因的XX雄鱼(XXgsdf+/+♂)：构建并线性化p817-gsdf2A-EGFP表达质粒，显微注射受精卵，获得稳定遗传的Tg:cryGsdf2A-EGFP转基因品系，所述的p817-gsdf2A-EGFP表达质粒的序列如SEQ ID NO:3所示，所述受精卵是1细胞期的受精卵；
c)遗传杂交方案：通过Tg:cryGsdf2A-EGFP转基因的XX雄鱼(XXgsdf+/+♂)与gsdfKO雌性(XYgsdf-/-♀)杂交获得gsdf杂合的XXTg雄性青鳉(XXgsdf+/-♂)，再与gsdfKO的雌性青鳉(XYgsdf-/-♀)杂交，最终获得gsdfKO转基因青鳉即Sissy青鳉模型。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述gsdfKO雌性青鳉是用锌指核酸酶特异性靶敲除内源gsdf获得。
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