[发明专利]一种盐酸法舒地尔中5-异喹啉磺酸甲酯的检测方法

说明书

本发明属于药物化学分析领域，具体地说，涉及一种盐酸法舒地尔中5‑异喹啉磺酸甲酯的检测方法。所述的方法为采用高效液相色谱‑质谱系统，分别将5‑异喹啉磺酸甲酯对照品溶液和盐酸法舒地尔供试品溶液进行检测。本发明的检测方法首先采用高效液相色谱法进行组分的分离，该色谱条件能够确定盐酸法舒地尔供试品溶液中5‑异喹啉磺酸甲酯色谱峰的位置，并将5‑异喹啉磺酸甲酯色谱峰与相邻的其他组分的色谱峰有效分离开来，且运行时间短；然后采用本发明的质谱条件进行高分辨一级质谱进行定量，其能够检测到ppm级别的5‑异喹啉磺酸甲酯，定量限可达ng/ml水平，因而能够对盐酸法舒地尔中的5‑异喹啉磺酸甲酯进行有效控制。

技术领域

本发明属于药物化学分析领域，具体地说，涉及一种盐酸法舒地尔中5-异喹啉磺酸甲酯的检测方法。

背景技术

盐酸法舒地尔是一种新型异喹啉磺胺类衍生物，能够通过增加肌球蛋白轻链磷酸酶的活性扩张血管，降低内皮细胞的张力，改善脑组织微循环，保护缺血脑组织，同时可拮抗炎症因子，保护神经抗凋亡，促进神经再生。盐酸法舒地尔及其注射液于2004年在中国上市，主要用于蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛等引起的缺血性脑血管疾病症状的改善。

杂质控制是药品质量控制的重要内容之一，药品中的杂质是否能被全面准确地控制，直接关系到药品的质量的可控性与安全性。因此，规范地进行杂质研究，并将其控制在一个安全、合理的限度范围内，对药物的临床安全具有重要的意义。盐酸法舒地尔的合成路线会生成多种杂质，5-异喹啉磺酸甲酯是其中具有基因毒性作用的杂质，其可能在生产过程中传递到盐酸法舒地尔成品中，为保证产品的安全性和可靠性，需要对其进行相应的控制和检测。基因毒性杂质一般允许的含量限度很低，在ppm的水平，通常的检测方法难以达到检测限和定量限。目前，针对盐酸法舒地尔中杂质的检测通常是对一般物质的检测。如《中国药典》2015年版二部记载的盐酸法舒地尔中有关物质测定方法为HPLC法，具体为：有关物质取本品，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含0.3mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。精密量取对照溶液5ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为灵敏度溶液。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以1.0％(v/v)三乙胺水溶液(用盐酸调节pH至7.0)-甲醇(50：50)(v/v)为流动相；检测波长为275nm。理论板数按盐酸法舒地尔峰计算不低于3000。盐酸法舒地尔峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。取灵敏度溶液20μl，注入液相色谱仪，使主成分色谱峰的信噪比应不小于10。精密量取供试品溶液与对照品各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分色谱峰保留时间的5倍。供试品溶液的色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.1倍(0.1％)(w/w)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(1.0％)(w/w)。供试品溶液色谱图中小于灵敏度溶液主峰面积的色谱峰忽略不计(0.05％)(w/w)。

经研究发现，在实际操作过程中，上述方法存在以下不足：

(1)此条件下5-异喹啉磺酸甲酯和盐酸法舒地尔分离效果较差，色谱峰基本重叠在一起，不能达到基线分离；

(2)此条件下5-异喹啉磺酸甲酯吸收极弱，不能检出。

针对上述缺陷，申请人开发了HPLC法测定盐酸法舒地尔中基因毒性杂质的方法(李开凤等，HPLC法测定盐酸法舒地尔中基因毒性杂质，海峡药学，2018年02期)，该方法采用高效液相色谱法，色谱柱：Thermo Scientific Hypersil GOLS C8(4.6×150mm，3μm)，流动相：0.1％甲酸溶液-乙腈(98∶2)等度洗脱；检测波长：275nm，流速：0.9m L·min^-1；进样量：20μL；柱温：30℃。该方法的定量浓度为0.337μg/ml，检测限浓度为0.084μg/ml，仍然较高，灵敏度不够，对盐酸法舒地尔中ppm水平的5-异喹啉磺酸甲酯不能有效检测。

有鉴于此特提出本发明。

发明内容