[发明专利]一种检测错误折叠蛋白质的装置、试剂盒和方法

说明书

本发明公开了一种检测样本中是否含有错误折叠蛋白或错误折叠蛋白聚集物的装置以及试剂盒和方法，检测装置包括测试部件和点样部件，测试部件包含微孔膜，点样部件包含毛细管。试剂盒包括能够与错误折叠蛋白和微孔膜结合的染料。检测时，将待测样本与染料混合，形成混合液，利用毛细管吸取该混合液，后将毛细管出液口与微孔膜充分接触，混合液从毛细管中缓慢释放到微孔膜上并将微孔膜染色，通过观察颜色的扩散情况判断待测样本中是否含有错误折叠蛋白或错误折叠蛋白聚集物。利用本发明进行检测，结果可通过肉眼或仪器识别，方便完成检测过程。特别地，本发明可以用于检测孕妇样本以预测、筛查、诊断孕妇子痫前期和子痫。

技术领域

本发明涉及一种检测装置和检测方法，具体地，涉及一种检测生物样本中错误折叠蛋白的装置和方法。

背景技术

蛋白质精确无误的天然折叠是一个复杂且容易出错的过程，即容易出现错误折叠，错误折叠蛋白就是由于错误折叠而形成的蛋白质，其与天然折叠形成的蛋白质构象不同。

蛋白错误折叠形成大量的排列成反向的β-折叠片层(β-sheet)结构。该结构由于疏水性表面暴露，导致蛋白质分子之间产生高度的粘着性，与其它错误折叠蛋白的β-Sheet结构聚集起来，聚集在一起的蛋白质分子，作为结晶核，使其他不相关的蛋白质共聚合形成错误折叠蛋白的聚集物，可容纳几乎无限的多肽链(Misfolded Protein Aggregates:Mechanisms,Structures and Potential for Disease Transmission，Semin Cell DevBiol.2011July；22(5):482–487.)，形成寡聚体和纤维状聚集物。

这些聚集物已经发现与多种老年人相关的神经退行性疾病相关，像阿尔兹海默症、帕金森等都是错误折叠蛋白造成的，虽然这些蛋白都不一样(阿尔兹海默症的amyloidβ肽、帕金森病的α-Synuclein蛋白、亨廷顿舞蹈症的Huntingtin蛋白、疯牛病的Prion蛋白)，它们错误折叠后形成β片层(β-sheet)结构，都能形成上述聚集物，具有相同的构象。

而最近的研究发现子痫前期患者的尿液和胎盘组织中含有大量错误折叠蛋白及其聚集物，而正常孕妇中则没有这种聚集物，从而发现子痫前期和子痫的发病和这些错误折叠蛋白及其聚集物相关。(Buhimischi et al.,Science Translational Medicine,2014,6(245):245ra92)。然而，目前临床上还没有利用这种标志物检测子痫前期的快速POC检测试剂盒。

发明内容

为了解决上述技术问题的至少一个，本发明的第一方面提供了一种检测样本中是否含有错误折叠蛋白质的装置，包括测试部件和点样部件，测试部件包含微孔膜，点样部件包含1、2、3个或更多个毛细管。进一步地，测试部件包括第一盖板和第一底板，所述第一盖板包含微孔膜。

进一步地，该装置还包括载样部件，其上设有一个或多个样本槽用于盛装样本(检测样本、阴性对照样本、和/或阳性对照样本)和/或染料。

在本发明的实施方案中，第一盖板上覆盖微孔膜。

在本发明的实施方案中，第一盖板上设置测试槽，测试槽中含有微孔膜。

根据本发明，任选地，点样部件为一空心盒状部件，其中含有1、2、3个或更多个毛细管；任选地，点样部件为一实心盒状部件，其上设有1、2、3个或更多个凹孔，用于放置相应的1、2、3个或更多个毛细管；任选地，点样部件为点样板，包括主体部分和毛细管，主体部分为板状部件，毛细管设置在侧面，毛细管数目为1、2、3个或更多个。毛细管一端为取液端，用于吸取和释放液体，另一端与点样板主体相连；任选地，点样部件为毛细管。

本发明的第二方面提供一种检测样本中是否含有错误折叠蛋白质的试剂盒，包括本发明第一方面所述的装置，还包括能够结合微孔膜和错误折叠蛋白的染料，优选地，染料选自杂环染料、刚果红、硫磺素、伊文思蓝中的一种或多种，更优选地，染料为刚果红。