[发明专利]单细胞中空纤维反应器的用途在审
申请号: | 201811354124.4 | 申请日: | 2018-11-14 |
公开(公告)号: | CN109504606A | 公开(公告)日: | 2019-03-22 |
发明(设计)人: | 赖俊凯;陈仲奇;陈献堂;赵美玲 | 申请(专利权)人: | 苏州致诺优生物医学有限公司 |
主分类号: | C12M3/00 | 分类号: | C12M3/00;C12M1/00;C12N5/09;C12Q1/02 |
代理公司: | 北京联瑞联丰知识产权代理事务所(普通合伙) 11411 | 代理人: | 黄冠华 |
地址: | 215010 江苏省苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 中空纤维反应器 中空纤维管 细胞培养 封口 生长 细胞生理状态 孔洞 细胞 两端开口 免疫活性 细胞生长 小鼠单核 药物活性 肿瘤细胞 接触点 管径 内折 植入 体内 测试 | ||
本发明公开了一种单细胞中空纤维反应器的用途,用于免疫活性调节药物活性测试的用途,中空纤维反应器包括多根平行排列的中空纤维管;每个中空纤维管表面均分布有多个孔洞,中空纤维管两端开口往内折入封口;将小鼠单核细胞和肿瘤细胞植入中空纤维管内,封口,形成单细胞中空纤维反应器。本发明提供一种利用中空纤维反应器进行细胞培养的方法属于3D细胞培养,细胞在管径中生长有足够的接触点可以提供生长讯号,相较于没有利用中空纤维反应器的方式细胞生长较快,细胞生理状态也比2D培养贴近生物体内的生长情况。
技术领域
本发明涉及组织工程和应用材料领域,特别涉及一种单细胞中空纤维反应器的用途。
背景技术
现有的免疫活性调节药物活性测试基于动物模型、体外原代细胞模型和连续细胞系模型三种。动物模型有实验周期长,效率低,小鼠建模难且花费昂贵以及临床应用性不足的问题。
利用微米尺寸具有纳米孔洞在管壁上之中空纤维管同时携带肿瘤细胞与免疫细胞后,将其植入老鼠皮下进行免疫检查点药物活性测试,此项方法可以解决目前利用免疫调节人源化小鼠花费时间过长,小鼠建购难且花费昂贵以及临床应用性不足的问题。
发明内容
针对上述现有的中空纤维管反应器的问题,本发明提供一种中空纤维反应器,该反应器能改善免疫调节人源化小鼠花费时间过长,小鼠建购难且花费昂贵以及临床应用性不足的问题。
为了解决上述技术问题,本发明采用的技术方案是:
一种单细胞中空纤维反应器的用途,其中,用于免疫活性调节药物活性测试的用途,所述中空纤维反应器包括多根平行排列的中空纤维管;每个所述中空纤维管表面均分布有多个孔洞,中空纤维管两端开口往内折入封口;将单细胞植入中空纤维管内,封口,形成所述单细胞中空纤维反应器。
优选的是,所述的单细胞中空纤维反应器的用途,其中,所述单细胞包括单核细胞和肿瘤细胞。
优选的是,所述的单细胞中空纤维反应器的用途,其中,所述中空纤维反应器用途中的中空纤维丝的材料是聚丙烯或聚氯烯。
优选的是,所述的单细胞中空纤维反应器的用途,其中,所述中空纤维管的直径为70~100μm,壁厚为2~4μm,长度为3~5cm。
优选的是,所述的单细胞中空纤维反应器的用途,其中,所述孔洞的直径为100~300nm。
优选的是,所述的单细胞中空纤维反应器的用途,其中,所述单细胞中空纤维反应器的尺寸为2cm×0.5cm~5cm×0.5cm。
优选的是,所述的单细胞中空纤维反应器的用途,其中,所述单细胞中空纤维反应器通过下述方法和步骤制备:
1)采用聚蔗糖密度梯度离心法从全血分离出单核细胞;
2)采用酵素将肿瘤样本分解成肿瘤细胞;
3)用醋酸电浆将中空纤维反应器表面改质10~30min,灭菌处理5~10min,将单核细胞和肿瘤细胞植入中空纤维管内,封口,制得单细胞中空纤维反应器。
优选的是,所述的单细胞中空纤维反应器的用途,其中,所述单核细胞的植入密度为2×105细胞/5μl;所述肿瘤细胞的植入密度为1×105细胞/5μl。
有益效果:
(1)本发明提供一种利用中空纤维反应器进行细胞培养的方法属于3D细胞培养,细胞在管径中生长有足够的接触点可以提供上涨讯号,相较于没有利用中空纤维反应器的方式细胞生长较快,细胞生理状态也比2D培养贴近生物体内的生长情况。
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