[发明专利]一种有序多孔神经导管材料的制备方法

说明书

本发明公开了一种有序多孔神经导管材料的制备方法，针对不同的神经导管材料制备中出现的材料机械强度不高、不均一、有机溶剂较难去除等难点，本发明通过定向冷冻干燥法制备了一种有序多孔儿茶酚改性壳聚糖神经导管三维支架材料，并且通过掺入氧化石墨烯使神经导管材料具备一定导电性，同时增强材料的力学性能，形成一种高强有序多孔的神经导管三维支架材料，同时，利用高分化的嗜铬细胞瘤细胞（PC12）监测细胞迁移及增殖过程，为神经导管移植和神经再生医学应用的材料选择提供途径。

技术领域

本发明涉及神经导管材料相关技术领域，具体是一种有序多孔神经导管材料的制备方法。

背景技术

周围神经损伤已成为一种常见的疾病，全世界每年有超过100万人遭受此疾病。神经损伤后的再生和修复已成为当前医学领域重大难题之一。随着显微外科设备和技术的发展，周围神经损伤修复的临床疗效不断提高，自体移植仍是当今临床周围神经损伤修复的金标准，但其来源有限，需从身体其他部位获取等问题会对患者造成二次伤害。目前，随着组织工程的发展，用组织工程的基本方法和原理构建神经导管已成为神经损伤后的再生和修复的研究热点。神经导管是根据神经再生的生物学特性，以生物或非生物材料设计成管状材料，应用于神经损伤的修复。

在神经导管材料中，基于生物相容性良好的有序多孔的神经导管，具有力学性能较好、孔径大小可协调以适应不同身体部位及细胞和孔隙率高的孔洞结构能促进细胞的迁移和增值等优点，在神经损伤修复和组织工程材料中具有广泛应用。

目前研究的神经导管材料种类繁多，适用于神经修复的组织工程材料主要有生物相容性好、生物可降解性等特点天然高分子和合成高分子材料，如壳聚糖、胶原、丝素、纤维素及聚乙二醇、聚丙烯酰胺、聚乙烯醇、聚乳酸等。神经导管材料的制备方法也多种多样，主要有浸涂法、旋涂法、浇筑法、静电纺丝法和冷冻干燥法等。

浸涂法和旋涂法操作简单易行，能有效控制管壁厚度和导管的结构，但是可能会有一定的有机溶剂残留。浇筑法制备的神经导管材料技巧灵活，可以用于多种高分子上使用。静电纺丝法是一种简单、低成本、高效的神经导管材料的制备方法，但是通常制得的神经导管材料的机械强度不均一，结构的紧凑程度不同等对导管的植入和手术有影响。

发明内容

本发明的目的在于针对不同的神经导管材料制备中出现的材料机械强度不高、不均一、有机溶剂较难去除等难点，通过定向冷冻干燥法制备了一种有序多孔儿茶酚改性壳聚糖神经导管三维支架材料，并且通过掺入氧化石墨烯使神经导管材料具备一定导电性，同时增强材料的力学性能，形成一种高强有序多孔的神经导管三维支架材料，同时，利用高分化的嗜铬细胞瘤细胞（PC12）监测细胞迁移及增殖过程，提供一种高强有序多孔神经导管三维支架材料的制备方法。

一种有序多孔神经导管材料的制备方法，包括包括以下步骤：

步骤一，合成儿茶酚改性壳聚糖

在常温下，将0.5g壳聚糖溶解于100 mL 0.05 mol/L的HCl溶液中，过夜搅拌得到1wt.%的壳聚糖溶液；NaOH溶液逐滴滴加到壳聚糖溶液中，再向溶液中加入0.4g 3,4-二羟苯基丙酸，搅拌至澄清后得到溶液A；同时将0.48g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐溶解于50 mL 50vol.%乙醇溶液中，得到溶液B，将溶液B逐滴滴加至溶液A中反应，将反应液置于含有NaCl（1wt.%）的pH=5.0的HCl溶液中透析48小时，每12小时换一次透析液，再在去离子水中透析24小时，将透析后的反应液在冰箱中冷冻结冰，最后冷冻干燥3天得到儿茶酚改性壳聚糖；

步骤二：定向冷冻法制备有序多孔儿茶酚改性壳聚糖复合材料