[发明专利]一种用于抑制TCF12基因的siRNA分子

说明书

本发明公开了一种用于抑制TCF12基因的siRNA分子，由如下序列的正义链和反义链组成：正义链是5’‑CAGUGAUAUACAUAGUUUANn‑3’，反义链是5’‑UAAACUAUGUAUAUCACUGNn‑3’。其中，正义链和反义链中的N相同或者不同，并且各自独立地是胞嘧啶C、尿嘧啶U、鸟嘌呤G、腺嘌呤A、脱氧胞嘧啶dC、脱氧鸟嘌呤dG、脱氧腺嘌呤dA或脱氧胸腺嘧啶dT；n代表N的个数，n是0、1或2。本发明的siRNA分子可用于制备治疗卵巢癌的药物。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种用于抑制TCF12基因的siRNA分子及其在制备抗肿瘤药物中的用途。

背景技术

卵巢癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一，发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌而列居第三位。卵巢癌中以上皮癌最多见，其次是恶性生殖细胞癌，卵巢上皮癌患者死亡率却占各类妇科肿瘤的首位，对妇女生命造成严重威胁。由于卵巢的胚胎发育、组织解剖及内分泌功能较复杂，早期症状不典型，术前鉴别卵巢肿瘤的组织类型及良恶性相当困难，卵巢上皮癌极易发生转移和侵袭，患者术中发现肿瘤局限于卵巢的仅占30％，早期诊断是一大难题。卵巢恶性肿瘤尤其是上皮癌难以早期发现，病因不明，除遗传性卵巢癌外，没有一级预防措施，目前主张早诊早治，争取早期发现病变，有关早期诊断的研究正在进行中。

TCF12基因是碱性螺旋-环-螺旋(basic helix-loop-helix，bHLH)E蛋白家族成员，可以识别E-box序列CANNTG(Thorsen等人，BMC genomics.2011,12:505；Chen等人，JBiol Chem.2013,288:9001-9010)。该基因编码的蛋白在多种组织和细胞中表达，包括骨骼肌、在胸腺、B细胞和T细胞，并可能通过与其他bHLH E-蛋白形成异源二聚参与调控种系特异性基因的表达。该基因有多种不同的转录剪接变异体，但这些变异体全长的性质尚未确定。

TCF12基因编码产物(TCF12，也称HTF4或Heb)是螺旋-环-螺旋(HLH)蛋白家族的一个成员(Zhang等人，Nucleic Acids Res.1991,19:4555；Hu等人，Mol.Cell Biol.1992,12,1031-1042)。根据组织分布、反应能力、和DNA结合特异性(Massari等人，Mol.CellBiol.2000,20,429-440)，HLH蛋白被分为七类。I类蛋白，由TCF3(E12，E47)、TCF4(E2-2)和TCF12(HTF4)基因编码，由于其DNA(E-box)结合能力也被称为E蛋白。这些蛋白质在许多组织中广泛表达并可形成同源或异源二聚体。II类蛋白，包括MyoD、myogenin和TWIST，可以与I类成员形成异源二聚体，并显示组织特异性表达模式。III蛋白，包含一个亮氨酸拉链结构域和HLH结构域，并包括Myc转录因子家族。第IV类成员包括一个蛋白家族如Mad、Max和Mxi，可与Myc形成二聚体。V类蛋白质缺乏基本区域，因此不能直接结合DNA。I类和II类成员为显性负因子。VI类成员在其基本区域有一个脯氨酸，VII类蛋白按其HLH-PAS结构域划分，成员包括如缺氧诱导因子1α和芳香烃受体。TCF12可以和肌形成蛋白、E12和ITF12形成同源寡聚体或杂低聚物，并能与PTF-1、RUNX1T1[12]和TCF调节子ID1(Jones-Mason等人，Immunity.2012,36:348-361)。

TCF12已被证明在神经元分化中起作用，在一些肿瘤中表达上调，如神经胶质瘤、黑色素瘤、结肠癌、口腔癌、胆囊癌及胰腺癌。有研究报道TCF12与肿瘤转移和浸润关系密切(Lee等人，J Biol Chem.2012,287:2798-2809.)。研究提示，TCF12可以作为抑制肿瘤的靶向分子之一。