[发明专利]一种苹果纯合基因型株系试管苗的室内嫩枝嫁接方法

说明书

本发明属果树组织培养和栽培技术领域，为解决苹果纯合基因型株系无法通过组织培养的方式生根移栽的问题，提供一种苹果纯合基因型株系试管苗的室内嫩枝嫁接方法。简便易行，完善了苹果纯合基因型种质创制体系，提高苹果育种效率。以苹果花药培养获得的纯合基因型植株为接穗，以苹果砧木实生种子苗为砧木，将纯合基因型植株嫁接在砧木上，通过对接穗的培养和选择、砧木的育苗和选取、嫁接及捆绑方法、嫁接苗的培养条件等进行研究，建立了一套可行的苹果试管苗室内嫁接技术体系，以接穗萌发出新芽为成活标准，嫁接成活率可达85%。且该技术不受季节条件因素限制，可周年进行、人为控制条件，为嫁接技术的应用提供新的途径。

技术领域

本发明属于果树组织培养和栽培技术领域，具体涉及一种苹果纯合基因型株系试管苗的室内嫩枝嫁接方法。

背景技术

苹果纯合基因型株系能够为苹果杂交育种快速提供纯合的亲本材料，缩短苹果育种周期，又是各种遗传学研究的理想材料，对苹果育种及遗传分析有重要意义。但通过组织培养获得苹果纯合基因型试管苗由于其基因型的完全纯合，且每一个株系都由不同的花粉发育而来，在不同株系的生根移栽过程中，发现很多株系不能通过组培的方式生根，或者生根后移栽困难、不能成活，因此这些植株不能顺利进入田间进一步用于研究，从而导致其不能发挥纯合基因型株系在苹果种质资源研究上的应用价值。不能开花结果，既不能作为育种材料使用，也不能作为遗传分析材料，不能发挥纯合株系在苹果种质资源研究上的应用价值。

在前期的通过组培苗生根中100个株系中仅有8个株系通过生根后成功移栽至田间，而且由于根系的不发达，这些植株在后期还在不断死亡，这是限制苹果纯合基因型组培苗在苹果育种技术发展的一个重要技术瓶颈。在不同株系的生根移栽过程中，绝大部分株系不能通过组培的方式生根移栽成活，这是限制苹果组培苗育种技术发展的一个重要技术瓶颈。

发明内容

本发明为了解决苹果纯合基因型株系无法通过组织培养的方式进行生根移栽的问题，提供了一种苹果纯合基因型株系试管苗的室内嫩枝嫁接方法。简便易行，完善了苹果纯合基因型种质创制体系，提高了苹果育种效率。

本发明由如下技术方案实现的：一种苹果纯合基因型株系试管苗的室内嫩枝嫁接方法，以苹果花药培养获得的纯合基因型植株为接穗，以苹果砧木实生种子苗为砧木，将苹果花药培养的纯合基因型植株嫁接在砧木上，具体方法如下：

（1）培养接穗：苹果纯合基因型植株增殖培养后，在壮苗培养基上培养获得株高≥3.0cm、直径0.2-0.3cm的组培苗，再进行5-7d的自然光炼苗，备用；

（2）培育砧木：沙藏后苹果砧木种子播种于消毒后的基质（草炭：蛭石：珍珠岩为1：1：1）中，保持基质的湿润，待种子发芽后，将获得的幼苗作为砧木，植株长到10-20厘米高，茎粗0.3-0.5厘米即可嫁接；

（3）嫁接：在具有保温、保湿和遮阳网的室内，除夏季温度最高一个月和冬季温度最低的一个月，其他时间均可嫁接，嫁接采用劈接方法，具体为：

1)处理砧木：选健壮苗，在离地8-15cm、叶柄上方2cm处剪断，去掉上部，保留5-10枚叶片，半木质化位置，用刀片横切砧木茎，然后从砧木横切面的中间向下纵切1.0-2.0cm深度的切口，深度不超上部第一枚叶片，备用；

2)制备接穗：经自然光炼苗后，选取生长旺盛、直径≥2mm、高≥3cm的苹果组培苗，保留上部3-5个叶片，用刀片切掉下部，接穗剪成1-2cm具有2-3片叶的茎段，接穗的生物学底端削成楔形；

3)插穗和包扎：削好的接穗迅速插入砧木的切口中，以至少一边的形成层对准的原则，使砧木和接穗的形成层紧密接触，然后对嫁接口进行密封与固定；

（4）嫁接苗的管理：嫁接后，其管理方法具体包括如下步骤：

A、保温：嫁接苗愈合前苗床温度为18-28℃，白天中午温度≤28℃，夜间≥18℃；