[发明专利]一种8-O-乙酰山栀苷甲酯和6-O-乙酰山栀苷甲酯的制备方法

权利要求书

1.一种8-O-乙酰山栀苷甲酯和6-O-乙酰山栀苷甲酯的制备方法，其特征在于，包括

(1)提取浓缩：取独一味药材为原料，经醇提，得到提取液A；所述提取液A减压浓缩至无醇，收集得浓缩液B；

(2)分离富集：

取所述浓缩液B上反相柱I进行吸附，得到过柱液C；

所述过柱液C上反相柱II进行吸附，吸附完成后，洗脱，得到洗脱液D；

所述洗脱液D浓缩至浸膏，得浸膏E；

(3)分离：

所述浸膏E溶解后，用硅胶拌样，得到柱原料F，将所述柱原料F上样，用二氯甲烷-甲醇体系梯度洗脱，得到洗脱液G；

洗脱液G浓缩至浸膏，得浸膏H；

(4)纯化：

所述浸膏H溶解后，通过制备型高效液相进行纯化，根据检测图谱的相应谱带收集溶液，可得到8-O-乙酰山栀苷甲酯纯品溶液浓缩I和6-O-乙酰山栀苷甲酯纯品溶液J；

(5)富集干燥：

所述溶液浓缩I，上反相柱III进行吸附，吸附完成后，洗脱，得到洗脱液K；将所述洗脱液K减压浓缩至干，再进行真空干燥，即得8-O-乙酰山栀苷甲酯纯品；

所述溶液浓缩J，上反相柱III进行吸附，吸附完成后，洗脱，得到洗脱液L；将所述洗脱液L减压浓缩至干，再进行真空干燥，即得6-O-乙酰山栀苷甲酯纯品。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)醇提过程，采用浓度为50％-100％的甲醇或乙醇进行提取。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)醇提过程，采用的提取方法选自回流提取、超声提取和渗漉提取中任一种。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)具体包括：提取浓缩：取独一味药材为原料，经醇提，提取次数3-6次，每次提取1-2小时，合并所有的提取液，得到提取液A；所述提取液A50-70℃减压浓缩至无醇，收集得浓缩液B。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)具体包括：分离富集：

取所述浓缩液B上反相柱I，进行吸附，得到过柱液C；

所述过柱液C上反相柱II进行吸附，吸附完成后，依次用水，浓度为30％以下的醇溶液，浓度为90-100％的醇溶液洗脱，得到洗脱液D；

所述洗脱液D50-60℃减压浓缩至浸膏，得浸膏E。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)具体包括：分离：

所述浸膏E用甲醇溶解后，用60-80目硅胶拌样，得到柱原料F，将所述柱原料F上样，依次用体积比为15：1-8：1的二氯甲烷和甲醇的混合溶剂，和体积比为8：1-4：1的二氯甲烷和甲醇的混合溶剂洗脱，收集体积比为8：1-4：1的二氯甲烷和甲醇的混合溶剂洗脱期间的洗脱液，得到洗脱液G；

洗脱液G减压浓缩至浸膏，得浸膏H。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)具体包括：纯化：所述浸膏H用甲醇溶解后，通过制备型高效液相进行纯化，根据检测图谱的相应谱带收集溶液，可得到8-O-乙酰山栀苷甲酯纯品溶液浓缩I和6-O-乙酰山栀苷甲酯纯品溶液J。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述(5)步骤中，所述洗脱过程采用90-95％醇溶液洗脱。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述反相柱I的反相柱填料选自大孔树脂、聚酰胺和NM100-反相聚合物色谱填料中任一种；所述反相柱II的反相柱填料为大孔树脂、聚酰胺和NM100-反相聚合物色谱填料中任一种；所述反相柱III的反相柱填料选自大孔树脂、聚酰胺和NM100-反相聚合物色谱填料中任一种。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂、D101型大孔吸附树脂。