[发明专利]玉米隐性核雄性不育突变基因ms34新等位基因的发现及其功能标记的开发与应用

说明书

本发明涉及一种玉米核雄性不育基因ms34的新等位基因的发现、突变位点分析及其功能标记的开发和应用。本发明利用F₂群体和SSR分子标记对突变基因ms34进行定位和图位克隆，发现突变基因ms34是Ms6021基因的一种新的等位突变基因，其突变是由于ms34基因第三个外显子中2bp碱基插入造成移码引起。根据其突变位点设计了包括但不限于ms34‑IN1和ms34‑IN2两个功能标记，通过PCR、酶切和聚丙烯酰胺凝胶电泳，可以特异性检测玉米突变体ms34及由其转育的玉米不育材料中的突变基因ms34，可高效应用于雄性不育株系的鉴定、目标单株的筛选，在玉米雄性不育系培育、不育化杂交制种和分子标记辅助选择中具有重要的应用价值，对提高玉米杂交育种和制种效率、保障制种质量等方面具有重要意义。

技术领域

本发明属于作物分子育种、分子生物学和基因工程领域。具体涉及一种玉米核雄性不育突变基因ms34的定位、克隆、功能标记的开发及其应用。

背景技术

本发明属于作物分子育种、分子生物学和基因工程领域。具体涉及一种玉米核雄性不育突变基因ms34的定位、克隆、功能标记的开发及其应用。

发明内容

本发明提供了一种调控玉米花粉发育基因ZmMs34的突变体ms34，通过基因定位和图位克隆，获得突变基因ms34的突变位点，并提供了一组能够准确检测和标记玉米隐性核雄性不育基因ms34的分子标记，所提供的分子标记是根据不育突变体的基因突变位点设计，与不育基因ms34共分离，属于功能性共分离分子标记，可用于植株的育性等位基因鉴定、分子标记辅助育种中目标单株的筛选和种子纯度鉴定等。

本发明的目的之一：在于提供一种由于育性相关基因ZmMs34突变产生的完全雄性不育材料。

本发明的目的之二：在于提供这种突变材料的基因突变位点。具体的，其基因突变是由于在第三个外显子中+791位点处2bp碱基插入造成移码引起。

本发明的目的之三：在于提供根据上述ms34突变位点开发ms34功能性分子标记的方法。

本发明的目的之四：在于提供根据上述突变位点开发的一组功能性分子标记，包括但不限于ms34-IN1和ms34-IN2等分子标记，能特异检测突变等位基因ms34基因和野生型ZmMs34。

进一步地，开发的分子标记ms34-IN1和ms34-IN2以及其它类似的功能性共分离标记包括但不限于以下四条引物序列：

ms34-IN-1F：TCGCAAGGAAGCTGGTCC

ms34-IN-1R：CGCCGAGTTGATGATGACG

ms34-IN-2F：TGYATTTGTTACATACWTGCACTTG

ms34-IN-2R：TGCATGGATCRCTGAAGA