[发明专利]哌啶基噻唑甲酰胺类化合物合成方法与用途

说明书

本发明涉及一种2‑（4‑哌啶基）‑噻唑‑4‑甲酰胺类化合物及其合成方法及药用评价。其合成包括如下步骤：N‑Boc‑4‑哌啶‑羧酸与氯化铵的取代反应制备中间体2；化合物2与劳森试剂进行硫代反应，得中间体3；化合物3与溴代丙酮酸乙酯反应，得中间体4；化合物4酯水解得化合物5；化合物5氨反应，得到中间体6；Boc保护的化合物6，脱去保护得化合物7；化合物7酸缩合，得到中间体8；Boc保护的中间体8脱保护得化合物9；化合物9与不同的异氰酸酯反应，得到最终产物；采用MTT法，测试，部分2‑（4‑哌啶基）‑噻唑‑4‑甲酰胺类化合物具有一定的抗肿瘤活性。其中化合物10f‑10m的抗肿瘤活性活性优于化合物10a‑10d。

技术领域

本发明涉及一种2-（4-哌啶基）- 噻唑-4-甲酰胺类化合物及其合成方法及药用评价，属于药物合成与药学评价技术领域。

技术背景

微管菌素（Tubulysins，图1)是一类具有强烈抗肿瘤细胞有丝分裂增殖的天然四肽化合物，自其合成报告以来，针对其全合成，结构改造以及抗癌的生物学活性引起广泛关注。天然产物的特征之一是含有多个手性中心，这对其商业发展与全合成造成阻碍。为了简化微管菌素的结构，保持或增强其效力，本文对其结构修饰及药用评价，进行了一定的研究。在药物设计学中，环化技术，尤其是芳构化通常用于减少现代药物设计技术中的手性中心和增加亲脂性。通过环化，可以减少天然产物中的手性中心，降低合成难度。

微管蛋白中的大多数手性中心来自非天然氨基酸。不仅难以合成主要活性部件（Tuv和Tup），而且还要避免在构建块的组装过程中的差向异构化和副反应。在我们以前的工作中，微管菌素的Tuv部分的芳构化（图2中的A）导致抗肿瘤活性的显着丧失。最初，我们猜想因为构象限制，基团之间存在弱的相互作用，从而能导致活性丧失。因此我们提出在Tuv中的OH基团和Ile中的NH基团之间可能存在分子内H键（顺时针转动键，可以通过分子内H键形成6元环）是其具有抗癌活性很重要的一点。

目前尚无该类寡肽的合成及活性研究。

发明内容

基于以上事实和原因，我们对微管菌素化合物结构进行了结构修饰和改造，设计并合成了一系列2-（4-哌啶基）-噻唑-4-甲酰胺类化合物，并且通过MTT法初步筛选了这类化合物的抗肿瘤活性。

即：2-（4-哌啶基）-噻唑-4-甲酰胺类似化合物，分子式结构如图2。

2 -（哌啶- 4 - 甲基）- 噻唑 -4-甲酰胺类化合物的合成路线是以已知化合物N-Boc-4-哌啶 - 羧酸为原料，包括如下9个步骤：

步骤1：N-Boc-4-哌啶 - 羧酸与氯化铵的取代反应制备中间体2，反应溶剂使用二氯甲烷，脱水剂用DCC，用量为1.5当量，反应温度为室温；

步骤2：化合物2与劳森试剂进行硫代反应，反应溶剂为1,4-二氧六环，用量为1当量，劳森试剂常温分批加入，反应温度为70℃，粗提纯得中间体3；

步骤3：化合物3与溴代丙酮酸乙酯反应，粗提纯得中间体4，反应溶剂为无水乙醇，用量为1.2当量，回流反应；

步骤4：化合物4在碱性条件下发生酯水解得化合物5，碱可选氢氧化钠、氢氧化锂或者其它碱，溶剂用水和四氢呋喃的混合溶液；

步骤5：化合物5与具有不同取代基的氨反应，得到不同的中间体6；活化剂与缩合剂使用EDC和HOBT；反应溶剂DMF；

步骤6：Boc保护的化合物6，在三氟乙酸和室温条件下，脱去保护得化合物7，用于下一步；

步骤7：化合物7与Boc保护氨基的酸缩合，提纯得到中间体8；活化剂与缩合剂使用EDC和HOBT；反应溶剂使用DMF，室温反应；

步骤8：Boc保护的中间体8在三氟乙酸的作用下，脱保护得化合物9 ，用于下一步；