[发明专利]基因分型检测试剂盒、其方法及维生素A利用能力检测的应用在审
| 申请号： | 201811373174.7 | 申请日： | 2018-11-19 |
| 公开（公告）号： | CN109402233A | 公开（公告）日： | 2019-03-01 |
| 发明（设计）人： | 钟宇萍;吴宇亮;李科铮 | 申请（专利权）人： | 深圳鼎新融合科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12Q1/6883;C12N15/11 |
| 代理公司： | 深圳市徽正知识产权代理有限公司 44405 | 代理人： | 卢杏艳 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市龙华新区龙华街道*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 信标探针 匹配 试剂盒 基因分型检测 维生素A 第二引物 第三引物 第四引物 第一引物 能力检测 配套试剂 灵敏度 应用 检测 | ||
1.一种基因分型检测的信标探针，其特征在于，所述信标探针的核酸序列如SEQ ID 3、SEQ ID 6、SEQ ID 9和/或SEQ ID 12所示；所述信标探针的5`端与荧光报告分子连接，3`端连接有猝灭剂。
2.根据权利要求1所述的信标探针，其特征在于，所述荧光报告分子包括FAM、HEX、Texas Red和Cy5，所述猝灭剂包括BHQ-1和BHQ-2。
3.根据权利要求1所述的信标探针，其特征在于，如核酸序列SEQ ID 3所示的信标探针用于检测BCMO1基因的rs12934922位点。
4.根据权利要求1所述的信标探针，其特征在于，如核酸序列SEQ ID 6所示的信标探针用于检测BCMO1基因的rs7501331位点。
5.根据权利要求1所述的信标探针，其特征在于，如核酸序列SEQ ID 9所示的信标探针用于检测BCMO1基因的rs6564851位点。
6.根据权利要求1所述的信标探针，其特征在于，如核酸序列SEQ ID 12所示的信标探针用于检测RBP4基因的rs10882272位点。
7.一种基因分型检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：
第一信标探针，所述第一信标探针的核酸序列如SEQ ID 3所示，其5`端与荧光报告分子FAM连接，3`端与猝灭剂BHQ-1连接；
与所述第一信标探针匹配的第一引物对；所述第一引物对的核酸序列如SEQ ID 1和SEQ ID 2所示；
第二信标探针，所述第二信标探针的核酸序列如SEQ ID 6所示，其5`端与荧光报告分子HEX连接，3`端与猝灭剂BHQ-1连接；
与所述第二信标探针匹配的第二引物对；所述第二引物对的核酸序列如SEQ ID 4和SEQ ID 6所示；
第三信标探针，所述第三信标探针的核酸序列如SEQ ID 9所示，其5`端与荧光报告分子Texas Red连接，3`端与猝灭剂BHQ-2连接；
与所述第三信标探针匹配的第三引物对；所述第三引物对的核酸序列如SEQ ID 7和SEQ ID 8所示；
第四信标探针，所述第四信标探针的核酸序列如SEQ ID 12所示，其5`端与荧光报告分子Cy5连接，3`端与猝灭剂BHQ-2连接；
与所述第四信标探针匹配的第四引物对；所述第四引物对的核酸序列如SEQ ID 10和SEQ ID 11所示以及检测配套试剂。
8.根据权利要求7所述的基因分型检测试剂盒，其特征在于，所述检测配套试剂包括：HS Taq聚合酶，UNG酶，MgCl2，PCR缓冲液，dU plus dNTP MIX，VA-Gene标准品对照品以及VA-Gene阴性对照品；
所述PCR缓冲液包括20mM(NH4)2SO4，10mM Tri-HCl以及2mM MgCl2。
9.一种基因分型检测方法，其特征在于，包括：
获取样本DNA；
应用如权利要求7或8所述的基因分型检测试剂盒，对所述样本DNA进行多重荧光定量PCR扩增，获得对应的溶解曲线的Tm值；
根据所述Tm值，判断所述样本DNA中rs12934922，rs7501331，rs6564851，rs10882272的基因型。
10.如权利要求8或9的基因分型检测试剂盒在人对维生素A利用能力检测上的应用。
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