[发明专利]利用新型填料从栀子中制备的藏红花素标准品及其制备方法

权利要求书

1.一种利用新型填料从栀子中制备藏红花素标准品的制备方法，其特征在于，将从栀子中提取的藏红花素粗品配制成溶液，将藏红花素粗品溶液注入装有新型填料的动态轴向压缩柱中，采用所述新型填料为固定相，有机溶剂作为流动相，在动态轴向压缩柱进行解析分离，得到藏红花素溶液，将藏红花素溶液浓缩去除有机溶剂，再将剩余的溶液干燥得到藏红花素标准品，所述新型填料采用如下步骤制备：

步骤S1、将苯乙烯、丙烯酸甲酯和过氧化二苯甲酰在室温下混合搅拌25～30min，再投入甲基环己烷，室温搅拌25～30min，获得单体；

步骤S2、向搅拌均匀的盐水中投入明胶和次甲基蓝，搅拌并加热至55～60℃，停止搅拌并保温，获得水相；

步骤S3、将所述单体和所述水相混合搅拌10～15min，获得混合物料，将所述混合物料缓慢升温至68～70℃，之后开始保温计时，保温4～5h，蒸汽加热缓慢升温至70～75℃，之后开始保温计时，保温6～7h，整个过程中持续搅拌，所述混合物料逐渐成型为球状颗粒的新型填料；

由所述藏红花素粗品制备藏红花素标准品的具体步骤如下：

步骤S15、采用乙醇、乙酸乙酯和正丁醇按体积比3～6:1～2:3～8配制成有机溶剂，作为藏红花素粗品的流动相；

步骤S16、将藏红花素粗品采用有机溶剂溶解，超声抽滤之后，将滤液用配制的流动相稀释为浓度为28～35mg/ml的样品溶液；

步骤S17、将200～300目的新型填料用流动相混合均匀，将混合均匀的液体装入动态轴向压缩柱，待流动相流出后压实新型填料，完成新型填料的装填，其中，新型填料装填的高度为200mm～800mm；

步骤S18、用配制的流动相反复冲洗压实的压缩柱，持续30～60min，待色谱仪检测工作站基线稳定即可达到平衡状态；

步骤S19、将样品溶液匀速均匀的注入达到平衡状态的动态轴向压缩柱中，采用紫外检测器检测样品分离的情况，根据色谱仪显示的保留时间和峰值的高度确定收集和停止收集的时间段，以此收集样品溶液，其中，样品溶液注入压缩柱的流速控制在0.2Bv/h～0.5Bv/h；

步骤S20、将收集的样品溶液进行浓缩分离去除有机溶剂，将剩余的溶液经喷雾干燥得到藏红花素标准品。

2.根据权利要求1所述的利用新型填料从栀子中制备藏红花素标准品的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，所述单体包括：苯乙烯120～130重量份，丙烯酸甲脂9～10重量份，过氧化二苯甲酰1～1.5重量份和甲基环己烷170～180重量份；所述步骤S2中，所述明胶为7～9重量份，所述次甲基蓝为0.01～0.03重量份，所述盐水的比重为1.12～1.2。

3.根据权利要求1所述的利用新型填料从栀子中制备藏红花素标准品的制备方法，其特征在于，对步骤S3获得的新型填料进行充分洗涤，具体包括如下步骤：

步骤S4、将所述新型填料完全浸泡在纯净水中，升温至45℃～50℃，保温并搅拌10～15min，排出纯净水并采用新的纯净水重复以上步骤4～5次。

4.根据权利要求1所述的利用新型填料从栀子中制备藏红花素标准品的制备方法，其特征在于，对步骤S4获得的新型填料进行后处理，具体如下：

步骤S5、把新型填料放入纯净水中进行蒸馏以去除所述甲基环己烷；

步骤S6、将新型填料投入反应釜中，先抽入甲醇，打开搅拌，再抽入液碱，使得PH值控制在7～8，然后开始升温至50～55℃，停止搅拌，恒温回流4～5h，然后把甲醇抽干；

步骤S7、向反应釜中投入甲醇和盐酸，打开搅拌调节PH值为3～4，升温至50～55℃，停止搅拌回流保温4～5h，然后把甲醇抽干；

步骤S8、向反应釜中投入甲醇，打开搅拌升温至50～55℃，保温4～5h，该步骤重复两次；

步骤S9、向反应釜中投入乙醇，打开搅拌升温至50～55℃，保温4～5h；

步骤S10、把反应釜中的甲醇及乙醇抽干，抽入纯净水煮沸，直至没有醇味，再将过新型填料过200～300目的水筛，即可获得所需的新型填料。