[发明专利]一株抗姜青枯菌的银杏内生球黑孢菌及其应用

说明书

本发明提供了一株抗姜青枯菌的银杏内生球黑孢菌及其应用，属于植物保护技术领域。本发明所述球黑孢菌(Nigrospora sphaerica)，保藏编号为CCTCC M 2018755。对所述菌株Gbh45的发酵产物进行稳定性测试，无论是紫外线照射、酸碱、高温处理对其抗青枯菌的影响都不大，该菌株发酵产物总体稳定性较高，在自然条件下不易变性。

技术领域

本发明属于植物保护技术领域，具体涉及一株抗姜青枯菌的银杏内生球黑孢菌及其应用。

背景技术

姜青枯病(又称姜瘟病)，是由青枯劳尔氏菌(Ralstonia solanacearum)引起的一种世界性重大土传病害，广泛分布于热带、亚热带及温带地区，也一直是我国生姜生产的最大障碍。据调查，生姜主产区常年由于姜青枯病的危害而损失20～30％，重者可达80％以上，且一旦大面积发病，很难采取补救措施。此外，腐烂的生姜中还含有黄樟素等对人体有害的物质。因此，对姜青枯劳尔氏菌(以下简称姜青枯菌)进行有效的防治，不仅能提高生姜的产量，而且可以提升生姜的品质。银杏(Ginkgo biloba L.)是我国特有的世界珍稀名贵树种，是银杏属现存的唯一生存种，经过上亿年的演化而存活下来，且在生长期中几乎不感染病虫害，除了其自身对病虫害特有的抗性外，根据内共生理论学说推测，这一现象与其协同进化的内生菌有独特的联系。已有研究表明银杏组织内部存在着多样性丰富的内生真菌，多株内生真菌的代谢产物具有较强的抑菌活性，特别是对植物病原菌的抑制作用因其在农业生产上的应用潜力而逐渐被重视。周松林等从银杏内生菌(Colletotrichumsp.NTB-2)发酵产物中分离得到的化合物apigenin-8-C-β-D-glucopyranoside对枯草芽孢杆菌、洋葱假单胞菌等有较强的抑制活性。张强等从银杏内生真菌液体发酵产物中分离12个化合物，发现化合物角鲨烯对6种植物病原菌有好的抑制活性，对马铃薯干腐病菌、烟草赤星病菌和玉米弯孢病菌的抑制活性较强。但对于银杏内生真菌抗姜青枯菌的研究未见报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一株抗姜青枯菌的银杏内生球黑孢菌及其应用，所述菌株的发酵产物稳定性好，无论是紫外线照射、酸碱、高温处理对其抗青枯菌的影响都不大。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一株球黑孢菌菌株(Nigrospora sphaerica)，保藏编号为CCTCC M2018755。

优选的，所述球黑孢菌菌株为银杏内生真菌，分离自银杏的叶。

本发明还提供了上述球黑孢菌菌株在抗姜青枯菌中的应用。

优选的，所述球黑孢菌菌株的发酵产物在抗姜青枯菌中的应用，所述发酵产物的制备方法，包括以下步骤：将所述球黑孢菌菌株接种于PDA斜面培养基上进行菌丝培养，得真菌菌丝；将所述真菌菌丝接种于PDB液体培养基中进行发酵，得发酵液；将所述发酵液离心后取上清液，得球黑孢菌的发酵产物。

优选的，所述菌丝培养的温度为25～32℃，培养时间为3～6d。

优选的，所述发酵的温度为26～30℃，发酵时间为7～12d。

优选的，在所述发酵过程中伴随振荡，所述振荡的速度为180～250rpm。

优选的，所述离心的速度为5000rpm，所述离心的时间为8～12min。

本发明提供了一株球黑孢菌菌株，所述球黑孢菌菌株在PDA培养基上，25℃黑暗条件下培养7d，菌落直径30～40mm，质地绒毛状，灰黑色，背面黑褐色(图1-A)；菌丝褐色，多分枝，具隔膜，直径2.5～5.0μm；分生孢子梗简单，着生侧生厚垣孢子；分生孢子黑色，球形，直径14～16μm(图1-B)。28℃非黑暗条件下摇瓶发酵，第7d开始产红色色素，发酵液颜色随时间的延长，颜色逐渐变深。