[发明专利]提高色绿藻胞内虾青素和藻油积累量的诱导培养方法有效
申请号: | 201811383416.0 | 申请日: | 2018-11-20 |
公开(公告)号: | CN109439611B | 公开(公告)日: | 2022-07-12 |
发明(设计)人: | 魏东;陈俊辉;黄滟波 | 申请(专利权)人: | 华南理工大学 |
主分类号: | C12N1/38 | 分类号: | C12N1/38;C12N1/12;C12R1/89 |
代理公司: | 广州新诺专利商标事务所有限公司 44100 | 代理人: | 张芬 |
地址: | 510450 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 提高 绿藻 胞内虾青素 积累 诱导 培养 方法 | ||
1.一种提高色绿藻胞内虾青素和藻油积累量的诱导培养方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、将色绿藻细胞进行活化培养以获得种子液;
S2、将步骤S1活化培养获得种子液接种至无氮含糖的培养基,同时加入植物激素类诱导物,在微藻培养装置中进行诱导胁迫培养;所述植物激素类诱导物选自赤霉素,其添加浓度为3.5~6.9mg/L;或所述植物激素类诱导物选自3-吲哚乙酸,其添加浓度为7.8~15.7 mg/L;或所述植物激素类诱导物选自3-吲哚丁酸,其添加浓度为9.9~49.9 mg/L。
2.根据权利要求1所述的提高色绿藻胞内虾青素和藻油积累量的诱导培养方法,其特征在于:所述植物激素类诱导物选自赤霉素,其添加浓度为6.9 mg/L;或所述植物激素类诱导物选自3-吲哚乙酸,其添加浓度7.8 mg/L;或所述植物激素类诱导物选自3-吲哚丁酸,其添加浓度为9.9 mg/L。
3.根据权利要求1所述的提高色绿藻胞内虾青素和藻油积累量的诱导培养方法,其特征在于:步骤S2中,加入植物激素类诱导物同时加入助溶剂,所述助溶剂在培养基中浓度为0.01%~0.1%;所述植物激素类诱导物为3-吲哚乙酸、3-吲哚丁酸、赤霉素中一种或两种或三种的组合。
4.根据权利要求3所述的提高色绿藻胞内虾青素和藻油积累量的诱导培养方法,其特征在于:所述助溶剂选自水、乙醇或二甲亚砜。
5.根据权利要求1所述的提高色绿藻胞内虾青素和藻油积累量的诱导培养方法,其特征在于:步骤S2中,将所述种子液接种至无氮含糖的培养基,并使种子液中色绿藻细胞密度稀释至2~3 g/L,加入植物激素类诱导物,分装至包括透明微孔板或类似薄层培养装置的微藻培养装置中,并置于振荡器中,然后在光照培养箱中进行诱导胁迫培养,采用白光光源,光源强度为300±30μmol m-2 s-1,光暗周期为0 h: 24 h ~ 24 h: 0 h,培养温度为20~30˚C。
6.根据权利要求5所述的提高色绿藻胞内虾青素和藻油积累量的诱导培养方法,其特征在于:步骤S2诱导胁迫的培养温度为20~30 ˚C,光源采用白光,光源强度为300μmol m-2s-1,光暗周期为24 h: 0 h。
7.根据权利要求1所述的提高色绿藻胞内虾青素和藻油积累量的诱导培养方法,其特征在于,步骤S2中所述无氮含糖培养基还包括如下浓度的组分:10 g 葡萄糖、0.175 g 磷酸二氢钾、0.075 g磷酸氢二钾、0.075 g 七水硫酸镁、0.025 g 二水氯化钙、0.025 g氯化钠、5 mg氯化铁、0.287 mg七水硫酸锌、0.169 mg一水硫酸锰、0.061 mg硼酸、0.0025 mg五水硫酸铜、0.00124 mg七水钼酸铵。
8.根据权利要求1所述的提高色绿藻胞内虾青素和藻油积累量的诱导培养方法,其特征在于:步骤S1中活化培养是将色绿藻细胞转接至液体培养基中进行循环往复振荡培养,培养温度为20~30 ˚C,光源强度为10~300μmol m-2 s-1,光暗周期为0: 24 h~ 24 : 0h,所述液体培养基pH 为6.0 ~ 7.0。
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