[发明专利]一种轻型脑外伤的血清分子诊断标记物及应用

说明书

本发明公开了一种轻型脑外伤的血清分子诊断标记物及应用，该标志物包括NGF、NT‑3、IGF‑2、HGF、NPY、CRP、MMP‑9或ICAM‑2中的一种或几种。其氨基酸序列如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.8所示。上述的标志物可应用于制备轻型脑外伤诊断产品中的应用。本发明为临床上进行轻型脑外伤的早期诊断提供了一种无创的方法，适于临床推广。

技术领域

本发明属于基因与生物技术领域，具体地说，涉及一种轻型脑外伤的血清分子诊断标记物及应用。

背景技术

脑外伤指由于外物造成的、头脑部肉眼可见的伤，一般可引起严重的后果。不同区域的脑损害可引起不同的症状，局灶性症状包括运动、感觉、言语、视觉、听觉异常等症状。而弥散性脑损害常影响记忆、睡眠或导致意识模糊和昏迷。随着现代工业和交通的发展，颅脑创伤的发生率居高不下，成为威胁人类，特别青壮年人群生命与健康的主要伤病。根据美国疾病控制和预防中心报告，每年大约有170万美国人遭遇颅脑创伤，其中75％-90％是轻型创伤性脑损伤。

尽管根据患者有受伤经过、全身及神经系统体检发现各种表现即可明确诊断中重度脑外伤，但轻型脑外伤由于急性症状，例如短时意识丧失、创伤后失忆、定向障碍等，经休息后迅速缓解，并且神经影像学上缺乏损伤的客观证据，因此难以明确诊断。

目前，轻型脑外伤的诊断依据是：格拉斯哥昏迷评分(GCS)13-15分、昏迷小于20分钟。然而患者昏迷史有时不能获得，如婴幼儿、智力障碍的老人、多发性创伤；或昏迷史不可靠，如醉酒、娱乐药物、镇静剂等；或患者有意慌报昏迷史。为了明确轻型脑外伤诊断及有效的预后预测，需要一种实用而客观的方法。

研究表明，一些血清生物标志物对轻型脑外伤的诊断能提供有价值的参考，生物标志物可能是轻型脑外伤明确诊断的有用的辅助检查指标，是临床检查和神经影像学检查的有价值的补充。对于脑外伤患者，使用新的生物标志物，可以提供快速、权威、无创、准确的实验指标，指导分诊、预测预后，促进治疗的进一步改进，为早期治疗干预提供可能性。生物标志物是生理或病理过程中特定的客观指标，可通过体液，如脑脊液和血液测定，TBI的生物标志物是指TBI导致脑细胞损伤破坏、解体，神经元或神经胶质细胞释放特异性蛋白进入体液(脑脊液和血液)，其水平与创伤引发的病理生理机制及损伤的严重程度相关。

脑外伤的生物标志物，特别是轻型脑外伤生物标志物的确定，面临着一些挑战，新的生物标志物作为一种有用的临床辅助检查，应具备以下3个基本特点：第一，高度的脑特异性，准确性和伤后体液中快速出现；第二，分析方法可靠并可重复测定，合理的成本和较短的检测时间，以及检测的高灵敏度；第三，能提供诊断和预后信息，有助于临床医生的观察、治疗与预后预测。

蛋白组学研究是即基因组学研究后的生命科学发展的一个大方向之一。蛋白质的结构和功能最终直接影响着生命活动的变化，基因转录水平的研究只能在一定程度上反映基因表达产物的变化，而真正发挥功能的蛋白要经过转录后加工、翻译调控以及翻译后加工等许多步骤和调控才能形成，因而对蛋白质的直接研究才能真实的解释各种生命现象。但是研究蛋白质的手段和方法还没有很大的发展，所以寻找有效、快捷的蛋白分析技术成为了至关重要的一个环节。蛋白芯片技术的出现给蛋白组学研究带来新思路。蛋白组学研究中一个主要的内容就是要研究在不同生理状态或病理状态下蛋白水平的量变，微型化，集成化，高通量化的抗体芯片就是一个非常好的研究工具，它也是蛋白芯片中发展最快的芯片，而且在技术上已经日益成熟。这些抗体芯片有的已经在向临床应用上发展，比如肿瘤标志物抗体芯片等，还有很多已经用在研究的各个领域里。

酶免疫测定是将酶催化作用的高效性和抗原抗体反应的特异性相结合的一种微量分析技术。酶标记抗原或抗体后形成的酶标记物，既保留抗原或抗体的免疫活性，又保留酶的催化活性。当酶标记物与待测标本中相应的抗原或抗体相互作用时。可形成酶标记抗原抗体复合物。利用复合物上标记的酶催化底物显色，其颜色的深浅与待检标本中抗原抗体的量相关。该方法敏感度可达到ng/ml～pg/ml水平。