[发明专利]一种黄瓜雌性SNP分子标记及其应用有效
申请号: | 201811391007.5 | 申请日: | 2018-11-21 |
公开(公告)号: | CN109207574B | 公开(公告)日: | 2021-07-20 |
发明(设计)人: | 曹齐卫;李利斌;孟昭娟;杨宗辉;王永强;杨桂兰 | 申请(专利权)人: | 山东省农业科学院蔬菜花卉研究所 |
主分类号: | C12Q1/6879 | 分类号: | C12Q1/6879;C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 | 代理人: | 韩百翠 |
地址: | 250100 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 黄瓜 雌性 snp 分子 标记 及其 应用 | ||
1.一种与黄瓜雌性相关的SNP分子标记,其特征在于,包含第一分子标记SNP1和第二分子标记SNP2;
所述SNP分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,SEQ ID NO.3所示序列自5’端起第133位碱基为SNP1,所述SNP1为T/G;所述SEQ ID NO.3所示序列自5’端起第203位的碱基为SNP2,所述SNP2为C/A;
SNP1均为G且SNP2均为A对应黄瓜雌性性状,SNP1均为T且SNP2均为C对应黄瓜非雌性性状。
2.权利要求1所述与黄瓜雌性相关的SNP分子标记在鉴定黄瓜雌性性状中的应用。
3.一种鉴定黄瓜雌性性状的方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)提取待测黄瓜基因组的DNA;
2)以待测黄瓜的基因组DNA为模板,利用SEQ ID SEQ1和SEQ ID SEQ2所述的引物对进行PCR扩增反应;
3)分析扩增产物的SNP位点,SNP1均为G且SNP2均为A对应黄瓜雌性性状,SNP1均为T且SNP2均为C对应黄瓜非雌性性状。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤2)中的PCR扩增反应体系为:10ng/μlDNA模板1μl,10pmol/μl引物各1μl,10mmol/L dNTPmix 0.5μl, TaqDNA聚合酶1ul,10×PCR反应缓冲液2.5μl,余量为超纯水,补齐至25μl;
所述步骤2)中的PCR扩增反应的程序为:95℃变性30s, 56℃退火 45s,72℃延伸1min,20循环;最后72℃延伸10min。
5.权利要求1所述的分子标记在黄瓜雌性分子标记辅助育种中的应用。
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