[发明专利]具有抗肿瘤活性的达玛烷型皂苷类化合物、其制备方法及应用

说明书

本发明公开了具有抗肿瘤作用的绞股蓝提取物式(I)和(II)化合物、其制备方法以及该化合物在医药中的应用，属于植物化学领域。本发明式(I)和(II)化合物的制备方法包括以下步骤：将绞股蓝经高温高压处理后用乙醇回流提取，浓缩；乙醇提取物加水混悬，并用HP‑20大孔树脂，以水、50％乙醇、95％乙醇分别进行洗脱；将95％乙醇洗脱液减压浓缩，与硅胶1∶1混合，用硅胶柱色谱分离，以20∶1～1∶1体积比的二氯甲烷/甲醇洗脱，分段，将其中第8段用制备色谱柱，以50∶50体积比的乙腈/水洗脱，即得。药效学试验表明，本发明式(I)和(II)化合物具有较强的抑制癌细胞增殖活性。

技术领域

本发明涉及一种从植物绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)中提取得到的具有抗肿瘤活性的皂苷类化合物；本发明还涉及该皂苷类化合物的制备方法以及该化合物在医药中的应用，属于植物化学领域。

背景技术

绞股蓝为葫芦科(Cucurbitaceae)绞股蓝属(Gynostemma)绞股蓝Gynostemmapentaphyllum(Thunb.)Makino的全草，具有清热解毒，止咳祛痰等功能。

绞股蓝中最主要的药效成分是皂苷类成分。研究表明，具有C20(21)和C20(22)双键的达木林B和达木林A与侧链C20位连有羟基的绞股蓝皂苷gypenoside L和gypenosideLI相比，具有更强的抑制癌细胞增殖作用，而它们在绞股蓝中的含量甚微。对于这些有较强活性的稀有皂苷，它们的来源有限而且在植物体内含量较低。如果用传统方法进行分离，不但耗费大量的药用资源，而且得率也很低。因此，对化合物进行合理的成分转化和特殊方法处理已经成为现代药学研究的热点，可创造更大的经济效益、社会效益和生态效益。

发明内容

本发明人在对绞股蓝热处理产物的有效成分研究中分离得到具有结构式(I)和(II)的新化合物，在现有文献中从未报道，于是对其进一步进行了药理实验，发现对人胃癌细胞SGC-7901，人肺癌细胞A549，人肺癌细胞H1299，人骨髓神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y，人膀胱癌细胞T24，人髓性白血病细胞K562具有抑制作用，从而完成了本发明。

本发明目的之一是提供一种下述式(I)或(II)的化合物：

其中，R₁、R₂和R₃彼此独立选自OH或糖基；

优选的：R₁或R₃为OH；R₂为糖基；

特别优选的，所述化合物的结构式为式(III)或(IV)所示：

本发明的另外一个目的是提供制备上述式(I)或(II)化合物的方法。

本发明的另外一个目的通过以下技术方案来实现的：

一种制备上述式(I)或(II)化合物的方法，包括：

(1)将植物绞股蓝的干燥全草的粗粉在高温高压下热处理后，用乙醇回流提取，提取液减压回收溶剂，得乙醇提取浸膏；

(2)将乙醇提取浸膏通过HP20树脂，用20％乙醇、50％乙醇洗脱后，用95％乙醇进行洗脱，95％乙醇洗脱液减压浓缩，得95％乙醇洗脱物；将95％乙醇洗脱物上硅胶柱色谱，用20∶1～2∶1体积比的二氯甲烷/甲醇洗脱，分段收集洗脱液得到13个组分，将其中第8个组分用半制备色谱柱(250×2.5mm，5μm)，流速为1mL/min，用50∶50体积比的乙腈/水洗脱，即得。

上述制备方法中，步骤(1)中优选将绞股蓝干燥全草的粗粉在125℃、0.24MPa条件下热处理3h-10h，用80％乙醇回流提取3次，3次回流提取的时间依次为2h、2h和2h；合并提取液，提取液减压回收溶剂，得乙醇提取浸膏；