[发明专利]PcFPS基因的引物对及利用该引物对扩增的基因在提高广藿香中百秋李醇含量的应用有效
申请号: | 201811398321.6 | 申请日: | 2018-11-22 |
公开(公告)号: | CN109371020B | 公开(公告)日: | 2020-07-03 |
发明(设计)人: | 吴友根;杨豫章;于靖;张军锋;杨东梅 | 申请(专利权)人: | 海南大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/54;C12N15/10;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/50 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 代芳 |
地址: | 570100 海*** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | pcfps 基因 引物 利用 扩增 提高 广藿香 中百秋李醇 含量 应用 | ||
1.一种用于扩增含PcFPS基因的片段的引物对,上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示;所述含PcFPS基因的片段的全长为1177bp。
2.权利要求1所述的用于扩增含PcFPS基因的片段的引物对在提高广藿香中百秋李醇含量中的应用。
3.一种权利要求1所述引物对扩增得到的含PcFPS基因的片段在提高广藿香中百秋里醇含量中的应用,所述PcFPS基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
4.根据权利要求2或3所述的应用,其特征在于,所述提高广藿香中百秋李醇含量的方法是:利用权利要求1所述引物对扩增得到含PcFPS基因的片段,构建含有PcFPS基因的重组质粒,将重组质粒转化至广藿香中,得到转基因广藿香;所述PcFPS基因在转基因广藿香中过表达。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述引物对扩增含PcFPS基因的片段时的扩增程序为:98℃30s;98℃10s,55℃30s,72℃1min,40个循环;72℃10min。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述引物对扩增含PcFPS基因的片段时的PCR反应体系包括:10×Ex Taq Buffer 2.5μl、dNTP Mixture 2.0μl、上游引物1.0μl、下游引物1.0μl、Takara Ex Taq 0.5μl、cDNA 0.5μl和H2O 17.5μl。
7.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述重组质粒选择pYES2或Pcambia1302作为基础载体进行构建。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述重组质粒通过农杆菌介导法转化至广藿香中。
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