[发明专利]一种软枣猕猴桃品种的组培快繁方法

说明书

本发明公开了一种软枣猕猴桃品种的组培快繁方法，涉及猕猴桃的组培快繁方法。本方法是：①获得无菌苗；②一步成苗诱导；③生根培养；④移栽；其特征在于：包括萌发培养基、一步成苗培养基和生根培养基及相应的培养条件。本发明采用三种针对性培养基对软枣猕猴桃品种进行组织培养，能在短期内快速繁育大量软枣猕猴桃种苗，增值系数可达9.0，并且通过组织培养能最大限度地保证种苗质量，提高种苗繁育速度，实现种苗工业化生产，满足生产上对软枣品种种苗的需求；直接组培品种种苗，建立品种采穗圃，打破传统嫁接繁殖中嫁接接穗的量的瓶颈，充分满足生产的需要。

技术领域

本发明涉及猕猴桃组培快繁方法，尤其涉及一种软枣猕猴桃品种的组培快繁方法。

背景技术

软枣猕猴桃果型漂亮，平均单果重4-20克，果面光滑，软熟果实无需剥皮，直接食用，深受广大消费者的喜爱。软枣猕猴桃果实耐储藏性一般。植株树势强健，以中、长果枝结果为主，实生苗第六年株产约6-8千克。虽然软枣猕猴桃能适应辽宁5-8.2℃的年均温，也能适应福建16.9-17.9℃的年均温，但在华中武汉地区，不同倍性的软枣猕猴桃会出现适应性分化，2倍体软枣猕猴桃能开花结果，但夏季生长缓慢，果实风味差，四倍体软枣猕猴桃花量少，部分年份出现只开花不结果的现象。猕枣1号和猕枣2号为中国科学院武汉植物园自主研发选育的软枣猕猴桃新品种，能很好地适应华中地区的生态环境，快速达到丰产。随着中国猕猴桃新品种选育速度的的加快，为了快速的推广新品种和保留新品种优良品质，采用猕猴桃的组织培养技术进行繁殖是最快速和有效的方法之一，目前猕枣1号、猕枣2号种苗来源主要是扦插苗和嫁接苗，组培育苗技术方法还未见报道，然而扦插成活率不高以及接穗质量及数量的限制都成为猕枣1号、猕枣2号大面积推广及产业化生产的一个瓶颈。

发明内容

针对现有技术中存在的缺陷，本发明的目的就在于提供一种软枣猕猴桃品种的组培快繁方法，即直接通过组织培养方法获得品质均一、优良的离体猕枣1号、猕枣2号组培种苗，并通过优化离体快繁体系，实现快速繁育猕枣1号、猕枣2号软枣猕猴桃优质种苗的目的，以供生产中不断增长的种苗需求。

本发明采取的技术方案如下：

以猕枣1号、猕枣2号一年生枝条水培萌芽为外植体，消毒后进行组织培养，获得无菌苗，以无菌苗茎段为再生组织来源，进行一步成苗的诱导分化、生根培养。茎段直接成苗率高达100%，且后期的增殖培养不需要更换培养基，增值系数可达9.0。短期内可快速获得大量优质品种种苗，实现猕枣1号、猕枣2号种苗工厂化快速育苗。

具体地说，本发明包括以下步骤：

①无菌苗的获得

1）于11月底从母树上剪取生长健壮腋芽饱满的一年生枝条，将枝条剪成30cm长枝段，每段5-10芽；

2）将所述枝段形态学上端用封口膜封好，形态学下端浸泡2‰蔗糖水溶液中室内培养，保持环境温度25±2℃，保证室内清洁，2-3天更换一次水溶液，两周后，腋芽萌出；

3）待腋芽芽体长至1-2cm时，取幼嫩芽体于超净工作台上，置于灭过菌的空瓶内，75%酒精表面消毒1min，倒出酒精，加入质量体积比为0.1%升汞深入消毒2-5min，升汞溶液与外植体充分接触震荡，保证消毒彻底，倒出消毒液，外植体更换入新的灭菌瓶内，无菌水震荡冲洗4-5次，再于灭菌滤纸上晾干；

4）去掉腋芽芽体基部的伤口及损伤的叶片，接种于外植体萌发培养基上；

5）18-25天后，芽体展叶，生长健壮，获得无菌苗；

②一步成苗诱导

1）于超净工作台上切取无菌苗茎段，带2-3个腋芽，置于再生培养基上，pH调至5.8，进行不定芽的再生诱导；

2）接种材料置于光照条件下培养；