[发明专利]一种猕猴桃金梅的组培快繁方法

权利要求书

1.一种猕猴桃金梅的组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：

①无菌苗的获得

1）于11月底从金梅母树上剪取生长健壮腋芽饱满的一年生枝条，将枝条剪成30cm长枝段，每段5-10芽；

2）将所述枝段形态学上端用封口膜封好，形态学下端浸泡2‰蔗糖水溶液中室内培养，保持环境温度25±2℃，保证室内清洁，2-3天更换一次水溶液，两周后，腋芽萌出；

3）待腋芽芽体长至1-2cm时，取幼嫩芽体于超净工作台上，置于灭过菌的空瓶内，75%酒精表面消毒1min，倒出酒精，加入质量体积比为0.1%升汞深入消毒6-10min，升汞溶液与外植体充分接触震荡，保证消毒彻底，倒出消毒液，外植体更换入新的灭菌瓶内，无菌水震荡冲洗4-5次，再于灭菌滤纸上晾干；

4）去掉腋芽芽体基部的伤口及损伤的叶片，接种于外植体萌发培养基上；

5）30-40天后，芽体展叶，生长健壮，获得无菌苗；

②不定芽再生诱导

1）于超净工作台上切取无菌苗幼嫩叶片，切成0.5*0.5cm叶盘，置于再生培养基上，pH调至5.8，进行不定芽的再生诱导；

2）接种材料置于光照条件下培养；

3）40-50天后，叶片直接再生不定芽；

③不定芽增殖、壮苗培养

再生获得不定芽在最佳不定芽再生培养基上继代一次后，将不定芽切分成单个芽体，置于增殖壮苗培养基上进行增殖壮苗培养，pH调至5.8；

④生根培养

将生长状态相对一致的高 2-3cm，具3-5片叶的不定芽切下，接种于生根培养基上进行生根培养，8-10天即现肉眼可见不定根，短粗、健壮，25-30天后根长1.0-3.0cm，3-5条根，即可移栽；

⑤移栽

1）生根培养25天后，直接取出生根瓶苗，用自来水洗净根基上的培养基；

2）种苗栽至装有营养土的小营养钵，营养钵上方加盖塑料薄膜，保证新移栽种苗所处的环境湿度为85%-90%，温度控制在25-30℃，10-15天后去掉塑料薄膜，环境湿度适当降低至60%-75%；

3）40-45天后常规水肥管理，环境温度控制在35℃以下，高温夏季需遮阴及湿帘降温；

其特征在于：

所述萌发培养基为：MS+TDZ 0.5-3.0 mg/L+1%-2%蔗糖+0.8%琼脂；

所述无菌苗的获得方法中，接种材料培养条件为：光照强度2400-2600Lx，光照12h/d，培养室内温度25±2℃；

所述叶片再生培养基为：MS+TDZ 0.5-2.0 mg/L+IAA 0.25-1.0 mg/L+3%蔗糖+0.8%琼脂；

所述叶片不定芽再生诱导方法中，接种材料培养条件为：光照强度2600-3000Lx，光照12h/d，培养室内温度25±2℃；

所述增殖壮苗培养基为：MS+TDZ 0.1-2.0 mg/L+IAA 0.01-0.1mg/L+3%蔗糖+0.8%琼脂；

所述不定芽增殖、壮苗培养方法，接种材料培养条件为：光照强度3200-3500Lx，光照12h/d，培养室内温度25±2℃；

所述生根培养基为：1/2MS+香蕉泥2-15 g/L+IAA 0.1-1.0 mg/L+0.8-1.5%琼脂；

所述生根培养方法中，接种材料培养条件为：光照强度3500-3800Lx，光照12h/d，培养室内温度25±2℃；

所述营养土成分为：黄壤土：草炭土：珍珠岩=2：1：1。