[发明专利]一株抑制炭疽菌和镰刀菌的杰米拉类芽孢杆菌及其应用

说明书

本发明公开了一株抑制炭疽菌和镰刀菌的杰米拉类芽孢杆菌及其应用。本发明从深海沉积物中分离获得一株杰米拉类芽孢杆菌(Paenibacillus jamilae)，该菌株已于2018年8月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.16231。该菌株对多种植物病原菌均有广谱抗性，对由胶孢炭疽菌引起的果树(柑橘、苹果、葡萄)炭疽病和由尖孢镰刀菌引起的蔬菜枯萎病均具有良好的防治效果。

技术领域

本发明属于生物技术防治领域，具体涉及一株杰米拉类芽孢杆菌及其在抑制病原真菌与防治真菌病害中的应用。

背景技术

胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz)是分布最广泛，寄主最多的一种病原菌，可以为害果树、蔬菜、林木等。苹果炭疽病是危害果实上的重要病害，在发病果园，一般病果率30％左右，严重的可达50％～60％，在易感病的品种上，可导致毁灭性损失。柑橘炭疽病是我国柑橘产区普遍发生的病害，该病主要危害叶片、枝条、花和果实，造成大量落叶、枝条枯死、大量落花和落果，带菌果实在贮藏期间继续危害，从而影响食用品质和商品价值，造成了严重的经济损失。

尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)是一种世界性分布的土传病原真菌，寄主范围广泛，可引起瓜类、茄科、香蕉、棉、豆科及花卉等100多种植物枯萎病的发生，镰刀菌经常侵染寄主植物的维管束系统，破坏植物的输导组织，并在植物生长发育代谢过程中产生毒素来危害作物，造成植物萎蔫死亡，影响产量和品质。

目前生产上常采用化学药剂防治植物真菌病害，这样不仅严重污染生态环境，而且增加农产品中有毒化学物质的残留量，对人类健康带来潜在危害，同时也易诱导病原菌抗药性的产生。生物防治具有无毒、无残留、无致病性、对人畜安全、环境相容性好等优点，所以必将推动农业的可持续发展。如今，对于生物防治的研究已经成为国内外的研究热点，利用生防细菌来防治植物病害是生物防治的一种主要手段。经检索，目前还没有杰米拉类芽孢杆菌用于植物真菌病害生物防治的相关报道。

发明内容

本发明的目的是提供一株杰米拉类芽孢杆菌ZDC-04以及在防治炭疽菌和镰刀菌引起的炭疽病和枯萎病方面的应用。本发明的菌株具有抗菌谱广、防治效果好、对环境友好的优势，因而具有良好的开发应用前景。

本发明所提供的菌株为杰米拉类芽孢杆菌(Paenibacillus jamilae)ZDC-04，分离于东海海底沉积物，已于2018年8月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏号为CGMCC No.16231。该菌株具有以下生物学特性：菌体长杆状，大小为(0.5～1.1)μm×(3.2～5.2)μm，产芽孢，革兰氏染色呈阳性，在LB培养基上30℃培养48h，菌落呈白色，圆形，边缘凸起。

本发明的杰米拉类芽孢杆菌ZDC-04的培养方法包括：

(1)普通培养保存采用2216E培养基或LB培养基：酵母提取物1g，蛋白胨5g，琼脂15-20g，过滤后的海水1000mL，pH调至7.4-7.5；胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，琼脂15-20g，水1000mL，pH调至7.0-7.2。

(2)液体培养采用2216E液体培养基或LB液体培养基：酵母提取物1g，蛋白胨5g，过滤后的海水1000mL，pH调至7.4-7.5；胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，水1000mL，pH调至7.0-7.2。

(3)发酵培养基：玉米粉15g，豆粕粉10g，麸皮8g，蔗糖6g，碳酸钙5g，磷酸二氢钾5g，氯化钠2g，水1000mL，调节pH为6.5。

本发明还提供了一种杰米拉类芽孢杆菌ZDC-04制备的发酵液，优选采用上述的发酵培养基发酵制得。