[发明专利]EB病毒潜伏膜蛋白在制备鼻咽癌分化诱导治疗诊断试剂中的应用

说明书

本发明公开了EB病毒潜伏膜蛋白在制备鼻咽癌分化诱导治疗诊断试剂中的应用，本发明发现了定量检测EB病毒潜伏膜蛋白基因LMP1与基因ATOH8、CHUK、CEBPA或/和KRT8的表达量的试剂在制备检测或辅助检测鼻咽癌试剂中的应用。本发明提供了一种新的潜在的针对ATOH8、CHUK、CEBPA或/和KRT8低表达引起的未分化的鼻咽癌的诊断策略，进一步联合检测LMP1与ATOH8、CHUK、CEBPA或/和KRT8用于诊断和/或治疗未分化鼻咽癌，为其靶向表观遗传的干预治疗提供潜在的诊断标准和治疗靶标。

技术领域

本发明涉及EB病毒潜伏膜蛋白LMP1的新应用，具体涉及LMP1在制备鼻咽癌分化诱导治疗诊断试剂中的应用。

背景技术

鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma，NPC)是一种发生于鼻咽粘膜的恶性肿瘤，是头颈部最常见的恶性肿瘤，其患病人数占头颈部恶性肿瘤的70％以上，是我国死亡率最高的恶性肿瘤之一。鼻咽癌原发部位隐蔽，早期不容易被发现。鼻咽癌病理分化差，恶性程度高，易呈浸润性生长。早期鼻咽癌最主要的治疗手段是放射治疗，分化型鼻咽癌早期治疗后的五年生存率可达70％以上，生存质量良好，但未分化型鼻咽癌不仅生存质量差，且五年生存率不到10％，给患者及其家人带来极大的痛苦。

鼻咽癌的这一未分化的重要特征提示诱导分化治疗(differentiation therapy)可能是治疗鼻咽癌的一个重要策略。然而，目前为止，关于鼻咽癌分化诱导治疗的精准诊断及治疗分子标记物尚不清楚。

鼻咽癌是典型的EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染相关性肿瘤。几乎所有的鼻咽癌患者都携带EBV。EBV作为诱发鼻咽癌的关键生物学因素的观点已被广泛接受。EBV诱导鼻咽上皮细胞去分化是其诱发鼻咽癌的关键步骤。对EBV转化淋巴细胞及鼻咽上皮细胞的研究显示，EBV潜伏膜蛋白1(latentmembrane protein,LMP1)是EBV诱导鼻咽上皮细胞转化并致瘤的关键蛋白。对LMP1在鼻咽癌中的表达及功能研究显示：LMP1在70％的鼻咽癌组织和几乎所有的EBV感染的侵袭性前鼻咽癌病变组织中显著表达；LMP1阳性的鼻咽癌细胞比LMP1阴性的鼻咽癌细胞更容易发生转移；过表达LMP1能够使永生化的正常鼻咽上皮细胞产生一系列恶性表型(如生长速度显著加快，迁移和侵袭能力显著增强，克隆形成能力显著增强)。对LMP1诱导鼻咽癌发生发展的分子机制研究显示：LMP1是一种不需要配体起作用的CD40模拟分子，其自身通过在细胞膜脂筏上聚集，即可激活下游信号分子，扰乱细胞内正常的信号通路而发挥其致瘤作用；LMP1可以通过JNK-AP-1信号通路激活DNMT1的表达，从而抑制E-Cadherin的表达，增强鼻咽癌的侵袭性；Twist是LMP1诱导鼻咽癌EMT的关键蛋白之一，暗示了上皮间质转化(Epithelial–Mesenchymal Transition,EMT)可能是LMP1诱导鼻咽癌去分化的重要过程；抗凋亡蛋白A20可能是LMP1诱导鼻咽癌去分化的下游蛋白之一。目前为止，转录因子NF-κB、AP-1和STAT被认为是LMP1在细胞核内的效应因子，调节Bcl-2、A20、MMP9等靶基因表达，参与细胞增殖、转化、凋亡和免疫等多种生物学反应过程。

目前，关于鼻咽癌去分化的基因指标及对应的反映鼻咽癌分化的基因指标的研究报道较少，鼻咽癌分化诱导治疗的研究也不成熟。

发明内容

本发明优化了一系列导致鼻咽癌去分化的基因指标及对应的反映鼻咽癌分化的基因指标。在本发明中，我们提出了EB病毒潜伏膜蛋白LMP1驱动的未分化鼻咽癌的基因检测方式，开发了相应的诊断治疗试剂盒奠定了基础。

本发明的目的之一在于提供定量检测EB病毒潜伏膜蛋白基因LMP1与基因ATOH8、CHUK、CEBPA或/和KRT8的表达量的试剂在制备检测或辅助检测鼻咽癌试剂中的应用。

本发明的另一目的在于提供抑制EB病毒潜伏膜蛋白基因LMP1表达的试剂与促进基因ATOH8、CHUK、CEBPA或/和KRT8表达的试剂在制备治疗或辅助治疗鼻咽癌产品中的应用。