[发明专利]一种发酵生产杆菌肽的方法

权利要求书

1.一种发酵生产杆菌肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)发酵液预处理：取重量为1000份的发酵液，并向发酵液中加入重量为30-60份的硫代硫酸钠后搅拌均匀，再将发酵液泵入预处理罐内，加入酸化剂调节PH至2.5-3.0，搅拌1h；

2)树脂吸附：向步骤1中酸化后的发酵液中加入液碱调节PH至4.0-4.5，然后按放罐效价投入001×1.1-H⁺吸附树脂对杆菌肽吸附3-6h，使得吸附尾液中杆菌肽含量不超过50U/ml；

3)树脂分离、漂洗：吸附完成后的树脂经树脂分离器将饱和树脂和料液分离，然后用去离子水漂洗至水清澈且无漂浮物；

4)解析脱氨：漂洗后的树脂经过真空抽入解析柱内，然后用去离子水对树脂全方位清洗至水澄清后，通入浓度为2.5-3.5％的氨水进行解析，并将解析液经脱氨柱内001×14-H⁺脱氨树脂进行脱氨，当脱氨液由无色变为浅黄色时，收集脱氨液于储存罐中，并加入重量为2-8份硫代硫酸钠，当脱氨柱出口的脱氨液PH≧8.5时，停止收集；

5)一次纳滤：将步骤4中的收集液通过纳膜浓缩至原体积8-10％；

6)萃取浓缩：将一次纳滤后的浓缩液放入萃取罐中，并加入重量为2-5份的硫代硫酸钠，充分搅拌后加入萃取剂进行萃取，向萃取液中加入沉淀剂后，沉淀过滤后，对滤液进行浓缩干燥即得杆菌肽。

2.根据权利要求1所述的发酵生产杆菌肽的方法，其特征在于，所述步骤1中酸化剂为草酸、醋酸和稀硫酸中的任一种。

3.根据权利要求1所述的发酵生产杆菌肽的方法，其特征在于，所述步骤2中的吸附树脂按放罐效价菌投放具体分为1400L、1600L、1800L、2000L和2200L五类大小，其对应的杆菌肽效价分别为≦400U/ml、401-500U/ml、501-600U/ml、601-700U/ml以及701-800U/ml。

4.根据权利要求1所述的发酵生产杆菌肽的方法，其特征在于，所述步骤4中解析速度为300-400L/h。

5.根据权利要求1所述的发酵生产杆菌肽的方法，其特征在于，所述步骤5中的纳膜浓缩的系统压力为0.4-1.5MPa，且浓缩过程中不产生背压。

6.根据权利要求1所述的发酵生产杆菌肽的方法，其特征在于，所述步骤6中的萃取剂为乙醇、正丁醇和乙酸丁酯其中的任一种。

7.根据权利要求1所述的发酵生产杆菌肽的方法，其特征在于，所述步骤6中的的萃取是在搅拌速度为30-50r/min的搅拌作用下，萃取20-30min。

8.根据权利要求1所述的发酵生产杆菌肽的方法，其特征在于，所述步骤6中的沉淀剂为乙醚、氯仿或丙酮中的任一种，且沉淀剂用量为萃取剂体积的2-3倍。