[发明专利]降低球等鞭金藻贴壁及提高生长量的方法有效
申请号: | 201811405142.0 | 申请日: | 2018-11-23 |
公开(公告)号: | CN109355193B | 公开(公告)日: | 2020-07-21 |
发明(设计)人: | 胡叶飞;张菊萍;董国强;张宏杰;金荣培 | 申请(专利权)人: | 杭州园泰生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/12 | 分类号: | C12N1/12;C12N1/38;C12R1/89 |
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地址: | 311400 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 降低 鞭金藻贴壁 提高 生长 方法 | ||
本发明属于藻类技术领域,公开了降低球等鞭金藻贴壁及提高生长量的方法,其包括如下步骤:将球等鞭金藻种子液按照5‑10%的接种量接种到含有培养液的反应池中,然后添加100‑200mg/L的氨基酸,20‑22℃培养,光暗比为12:12,通气速率为0.4‑0.5vvm;培养48‑72h,收集藻细胞。本发明方法可以明显降低球等鞭金藻的贴壁现象,提高藻细胞生物量。
技术领域
本发明属于藻类技术领域,具体涉及降低球等鞭金藻贴壁及提高生长量的方法。
背景技术
球等鞭金藻是一种单细胞微藻,属普林藻纲等鞭藻目,等鞭藻科,等鞭藻属,藻体为单细胞或集成群体,附着生长,呈金褐色,除含叶绿素外,尚含有较多的类胡萝卜素,营光合自养,培养方式简单,成本低廉,增殖速率快,细胞内含有丰富的不饱和脂肪酸。
现有的研究大多集中在如何提高藻细胞的不饱和脂肪酸产量的研究中,例如,中国发明专利“CN201410597451”公开了一种提高金藻中DHA含量的方法,包括往培养液中添加一定量的甘油,DHA产量可以提高,同时提高了其他脂肪酸的含量。对球等鞭金藻的前期生长状况研究较少,申请人在之前的研究成果“提高球等鞭金藻生物量以及DHA产量的方法”等相关项目已经申报国家发明专利,其中,在前期的培养过程中通过添加萘乙酸钠和赤霉素,可以提高球等鞭金藻的分裂速率,后期通过添加一定浓度的花生四烯酸和没食子酸丙酯,提高了DHA产量。
目前,球等鞭金藻最主要的方式是规模化人工培养。然而,在球等鞭金藻的培养过程中,因重力、曝气不均和球等鞭金藻的本身生理特性等,培养装置内壁或与藻液接触的物件上常常会出现贴壁现象。轻微的贴壁现象不会对藻细胞生长产生影响,但是一旦发生大规模贴壁现象,将产生恶性循环并形成不利影响,使藻细胞摄取营养困难、生存环境恶劣以及光照不足,如何在规模化培养球等鞭金藻中避免大规模贴壁现象的发生,是我们需要解决的技术问题。现有技术“CN105754861A”公开了一种减少小球藻贴壁的方法,包括在培养液中添加乳化剂,能够减少小球藻的贴壁,提高生物量;尽管该专利中认为添加乳化剂不会对小球藻的生长有不利影响,单是乳化剂会少量残留于藻类提取物中,为了提升藻类提取物的品质,我们要尽量避免乳化剂等化学物质的残留。
发明内容
针对现有技术存在的缺陷,本发明提供了降低球等鞭金藻贴壁及提高生长量的方法,该方法可以显著降低球等鞭金藻的贴壁现象,提高生物量。
本发明是通过如下技术方案来实现的:
降低球等鞭金藻贴壁及提高生长量的方法,其包括如下步骤:
将球等鞭金藻种子液按照5-10%的接种量接种到含有培养液的反应池中,然后添加100-200mg/L的氨基酸,20-22℃培养,光暗比为12:12,通气速率为0.4-0.5vvm;培养48-72h,收集藻细胞。
进一步地,
所述培养液的组分为:硝酸钠2g/L,碳酸钠0.5g/L,氯化铵0.2g/L,氯化钠0.2g/L,硅酸钠0.1g/L,磷酸二氢钾0.1g/L,氯化铁 20mg/L,氯化锰 20mg/L,萘乙酸钠20mg/L,赤霉素10mg/L。
进一步地,
所述氨基酸为组氨酸、精氨酸或二者的混合物。
优选地,
所述氨基酸为组氨酸。
优选地,
所述氨基酸为组氨酸和精氨酸的混合物。
优选地,
所述氨基酸为组氨酸和精氨酸按照(1-3):1的质量比的混合物。
优选地,
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