[发明专利]面向医药废水中粪大肠菌群快速检测方法

权利要求书

1.面向医药废水中粪大肠菌群快速检测方法，其特征在于：

包括以下步骤。

2.培养基配制

1) 增菌培养基配制：称取26.5g 增菌培养基，加入预热42 ± 1℃去离子水1 L ，充分溶解，备用；

2） 选择性培养基配制：称取7.5g选择培养基，加入预热42±1℃去离子水10mL，充分溶解，备用。

3.无菌操作取 25g (mL)样品到均质袋中，并向其中加入225mL预热后的增菌培养基，放入均质器中均质 2min ，42℃静止或者振荡培养6h，根据需要也可以延长至24h，取0.1mL上述增菌液，加入含1mL选择性培养基的5mL玻璃管内，42±1℃继续培养18-24h。

4.将样品垫、结合垫（含金标抗体，干燥）、硝酸纤维素膜（检测线：大肠杆菌O157：H7多抗1mg/mL;质控线：兔抗羊1mg/mL),吸水垫依次贴在带有黏合剂的PVC背板上，切成4mm宽的试纸，室温干燥备用。

5.将培养物混合均匀，取1mL到试管中沸水（100℃）加热10min，冷却至室温，用滴管滴加3-4滴至胶体金试纸的样品孔，反应5-10min，判读结果，超过30 min显色无效。

6.根据权利要求 1所述的一种大肠杆菌的快速检测方法，其特征在于，所述增菌培养基包括以下原料（按重量份数计）：葡萄糖80份、七水合硫酸模0.5-1.5份、硫酸镀3-5份、硝酸纳3-5份、酵母粉20-25份、棉籽蛋白5-15份、蛋白胨5-14份、磷酸二氢钾0.2-3份、磷酸氢二钾0.5-5份。

7.根据权利要求 1所述的一种大肠杆菌的快速检测方法，其特征在于：所述选择性培养基包括以下原料（按重量份数计）：乳糖10～26份，琼脂 15～20份，牛胆盐1～7份，氯化钠2～7份，亚碲酸钾2.5～7.5份，山梨醇 10～20份 ，肌醇4～7份，蛋白胨15～25份，羧甲基纤维素纳0.01～0.9份，磷酸氢二钾2.5～7.5份。