[发明专利]一种枯草芽孢杆菌菌株及其应用有效
申请号: | 201811409452.X | 申请日: | 2018-11-23 |
公开(公告)号: | CN109486707B | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
发明(设计)人: | 范俊峰;张波;陈敏;宋佩泽;周发;牛琳茹 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学;北农智谷(北京)科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A23B7/155;C12R1/125 |
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地址: | 100000 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 枯草 芽孢 杆菌 菌株 及其 应用 | ||
本发明实施例公开了一种枯草芽孢杆菌菌株及其应用,所述枯草芽孢杆菌菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCC NO.16569;保藏时间为:2018年10月10日。本发明实施例还提供了一种含有所述枯草芽孢杆菌菌株代谢产物的枯草芽孢杆菌高密度发酵液。本发明实施例提供的一种枯草芽孢杆菌菌株能够对炭黑曲霉、黑曲霉、产黄青霉进行有效抑制,而炭黑曲霉、黑曲霉、产黄青霉是葡萄易生的霉菌,因此含有枯草芽孢杆菌菌株代谢产物的枯草芽孢杆菌高密度发酵液能够有效延长葡萄贮存期,具有高效、安全和环保等特点,有广阔的应用前景。
技术领域
本发明实施例涉及微生物应用技术领域,具体涉及一种枯草芽孢杆菌菌株及其应用。
背景技术
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是芽孢杆菌属的一种,具有防止生物氧化,颉抗致病微生物、改善体内外生态环境、增强动物免疫功能、产生多种消化酶和营养物质的作用。枯草芽孢杆菌生长过程中可产生枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显抑制作用的活性物质。肠道当中的枯草芽孢杆菌因其可以快速消耗游离的氧,从而可以降低肠道氧,使有益的厌氧菌较好的存活而抑制部分致病菌。有研究证明在鸡饲料中添加枯草芽孢杆菌能使鸡盲肠中沙门氏菌的平均水平显著减少58%,这不仅仅降低了生命体感染的风险,而且还有助于改善食品安全。因此具有高抗真菌活性的枯草芽孢杆菌无论在帮助改善人体健康状态还是在保障食品安全方面都有着重要作用。枯草芽孢杆菌,作为一种革兰氏阳性细菌,长期以来一直被用来发酵大豆食品、广泛用于工业酶和化学品的生产。
但是现有的枯草芽孢杆菌罕有发现在抑制炭黑曲霉、黑曲霉、产黄青霉中取得较好效果的菌株。
发明内容
为此,本发明实施例提供一种枯草芽孢杆菌菌株及其应用,以解决现有技术中罕有发现在抑制炭黑曲霉、黑曲霉、产黄青霉中取得较好效果的菌株的问题。
为了实现上述目的,本发明的实施方式提供如下技术方案:
在本发明的实施方式的第一方面中,提供了一种枯草芽孢杆菌菌株,其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为:CGMCC NO.16569;保藏时间为:2018年10月10日。
在本发明的实施方式的第二方面中,提供了一种含有所述枯草芽孢杆菌菌株代谢产物的枯草芽孢杆菌高密度发酵液。
在本发明的实施方式的第三方面中,提供了一种所述枯草芽孢杆菌高密度发酵液的制备方法,包括:
菌种种子液制备:将所述枯草芽孢杆菌活化,取活化后的枯草芽孢杆菌单菌落划线于培养基上,之后进行封胶并放入培养箱中培养,得到活化的菌株,将活化的菌株转入培养基中培养,即制得所述的菌种种子液;
发酵液的制备:将所述的菌种种子液接种在装有高密度培养基的容器中培养,制得菌悬液,将所述菌悬液离心后收集上清液,上清液过滤并除菌即制得所述的枯草芽孢杆菌高密度发酵液。
在本发明的一个实施例中,所述菌种种子液的制备方法包括:将枯草芽孢杆菌在NA平板培养基上活化,取活化后的枯草芽孢杆菌单菌落划线于NA培养基上,之后进行封胶并倒置于温度为33℃培养箱重培养24h,得到活化的菌株,用移菌环将活化的菌株转移至LB培养基中,在温度为33~50℃,转速为180~300r/min的条件下培养24~50h,制得所述的菌种种子液;
在本发明的一个实施例中,所述的菌种种子液于温度为-1~4℃的环境下保存备用。
在本发明的一个实施例中,所述NA平板培养基或NA培养基的原料包括:蒸馏水、牛肉浸膏、蛋白胨、葡萄糖和琼脂;其中,每1000mL蒸馏水对应3.0g牛肉浸膏、7.0g蛋白胨、10.0g葡萄糖、15.0g琼脂;
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