[发明专利]一株高效降解黄曲霉毒素的短黄杆菌生防菌株及其应用

说明书

本发明属微生物领域，具体涉及一株高效降解黄曲霉毒素的短黄杆菌生防菌株及其应用。短黄杆菌生防菌株3J2MO已于2017年6月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，保藏编号为CCTCC No.M 2017329。本发明中使用的短黄杆菌生防菌株能显著降解黄曲霉毒素。可用于降解黄曲霉毒素，治理粮食作物的黄曲霉毒素污染。

技术领域

本发明属微生物领域，具体涉及一株高效降解黄曲霉毒素的短黄杆菌生防菌株及其应用。

背景技术

黄曲霉菌是一种病原性真菌，能产生一类强致癌有剧毒的真菌毒素-黄曲霉毒素，包括B、G和M族，其中B1最普遍且毒性最强。其能广泛污染花生，玉米等粮食作物，严重威胁人及家畜的健康，并造成极大的经济损失。因此，加强黄曲霉及毒素污染的治理刻不容缓。

传统去除AFB1的方法主要有吸附、萃取、热处理、射线处理、酸碱处理、氧化还原处理，但是有时费时费力、去毒率不高、易造成营养物质流失。而生物法具有安全、高效、持久的优点。因此，加强黄曲霉毒素生物治理的研究对我国农业产业及经济效益具有重要的意义。

细菌及代谢产物生物降解黄曲霉毒素的报道并不多。关舒、李俊霞等应用香豆素培养基筛选出的嗜麦芽窄食单胞菌能降解黄曲霉毒素，降解率为82.5﹪。王宁等对一株来源于灰叶猴粪便的橙红色粘球菌进行研究，发现其在最佳培养条件下对AFB1的降解率达到78.2％。在现有研究中，暂未见使用短黄杆菌降解黄曲霉毒素的报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一株高效降解黄曲霉毒素的短黄杆菌生防菌株3J2MO及其应用。本发明中的短黄杆菌生防菌株3J2MO能显著降解黄曲霉毒素。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：

短黄杆菌生防菌株3J2MO(Myroides odoratimimus 3J2MO)，已于2017年6月13日保藏于中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，保藏地址：中国，武汉，武汉大学，保藏编号为CCTCC No.M 2017329。

本发明将于湖北黄陂花生地里采集的土壤梯度稀释后取100μL于LB固体培养基中涂平板进行培养，将长出的细菌用接种环挑出转接到新鲜的LB固体培养基中进行平板划线，多次转接后挑取单菌落，通过降解黄曲霉毒素实验筛选出一株对黄曲霉毒素有显著降解作用的菌株3J2MO，保藏于中国典型培养物保藏中心，简称CCTCC，保藏地址：中国，武汉，武汉大学，保藏编号为CCTCC No.M 2017329。利用16S rDNA特异性扩增技术结合形态特征、生理生化实验对其菌种鉴定，结果表明这是一株短黄杆菌(Myroides odoratimimus)，属于放线菌目，短杆菌属。

表1：短黄杆菌3J2MO的主要生物学特性：

提供用于降解黄曲霉毒素的制剂，其包括上述短黄杆菌3J2MO的发酵物。

按上述方案，所述制剂的制剂形式为液体、喷粉、干燥可湿性粉剂或干燥可湿性颗粒。

按上述方案，所述制剂为液体，制剂中短黄杆菌3J2MO的终浓度为(1-9)×10⁷CFU/mL。

按上述方案，所述制剂为短黄杆菌3J2MO发酵液，短黄杆菌3J2MO发酵液中短黄杆菌3J2MO的终浓度为(1-9)×10⁷CFU/mL。

按上述方案，所述短黄杆菌3J2MO发酵液的制备方法为：短黄杆菌3J2MO在LB平板中活化，在28℃培养箱中培养24h，用挑针挑取短黄杆菌的单菌落，转移至液体培养基中，振荡培养12h-24h，吸1％-3％培养液转接至新鲜的LB液体培养基中，振荡培养12h-24h，获得拮抗菌株短黄杆菌3J2MO的发酵液。