[发明专利]一种炽椇子的组织培养快繁方法

说明书

本发明公开了一种炽椇子的组织培养快繁方法，炽椇子种苗主要通过种子和扦插方式繁育，存在周期长、成本高、效率低下等问题。因此，本发明以炽椇子带节茎段为外植体，通过不定芽诱导、增殖、生根、炼苗移栽等过程成功获得了炽椇子离体再植株，建立炽椇子组织培养快速繁殖技术体系，对于进行炽椇子优良品种的快速繁殖和大面积推广、促进炽椇子的产业化发展具有重要意义。

技术领域

本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种炽椇子的组织培养快繁方法。

背景技术

炽椇子为鼠李科植物,取其干燥成熟种子。主产陕西、广东、湖北、浙江、江苏等，秋季果实成熟时采收，将果实摘下，碾碎果壳，筛出种子，晒干。气微弱，味苦而涩。具有醒酒、清热、止渴利尿。用于酒醉，烦热，口喝，小便不利。目前，炽椇子种苗主要通过种子和扦插方式繁育，种子播种虽然可在短时间内获得大量幼苗，但因炽椇子后代易发生性状分离，遗传性状不稳定，易丢失亲本的优良性状。而扦插方式繁育需要大量的枝条，且从扦插到移栽大田需2个月，耗时较长。因此，釆用植物组织培养技术来缓解其种苗紧张压力、进行可持续开发利用是十分必要的。因此，本发明以炽椇子带节茎段为外植体，通过不定芽诱导、增殖、生根、炼苗移栽等过程成功获得了炽椇子离体再植株，建立炽椇子组织培养快速繁殖技术体系，对于进行炽椇子优良品种的快速繁殖和大面积推广,促进产业化发展具有重要意义。对比文件1，申请号：CN201310400879，发明名称：一种枳棋子果汁饮料及其制备工艺，其中枳棋子果汁由以重量百分比计的下列组分组成：枳棋子10-15；木瓜10-15；白砂糖10-12；黄原胶0.015-0.04；羧甲基纤维素钠0.015-0.04；山梨酸钾0.3；纯净水加至100。本发明是一种以枳棋子、木瓜为主要原料经调配、灭菌、灌装而成的保健型饮品，营养成分高，口感好，能够满足人们对于保健饮品的需求，枳棋子具有养阴、生津、润燥、止渴、凉血等作用。本案与对比文件不同。

发明内容

本发明的目的在于提供一种炽椇子的组织培养快繁方法，通过诱导不定芽、丛生芽增殖、试管苗生根、炼苗移栽等阶段成功获得了炽椇子离体再植株，建立炽椇子组织培养快速繁殖技术体系，从而实现了本发明的目的。

本发明的一种炽椇子的组织培养快繁方法，包括以下的工艺步骤：

步骤（1）,诱导不定芽：选取炽椇子当年生带节藤茎为外植体,经75%酒精消毒23秒种后，用无菌水冲洗8次后置于0.1%的升汞溶液中消毒33分钟，然后用无菌水冲洗9次，经无菌滤纸吸干水分后剪切成7cm左右的带节藤茎，并接种到诱导培养基上,于25～28℃条件下全暗培养，直至诱导形成不定芽；诱导培养基为：MS+0.8mg/LTDZ+2.3mg/L 6-BA+0.8mg/LNAA+33g/L蔗糖+6.3g/L琼脂，pH为5.9;

步骤（2）,继代培养：将步骤（1）获得的不定芽从基部切下，接种到增殖培养基上进行继代培养，接种后置于每天光照18小时，光照强度为2300lx，培养温度为25～28℃的条件下培养，33天转接一次；增殖培养基为：MS+2.3mg/L 6-BA+0.8mg/LNAA+33g/L蔗糖+6.3g/L琼脂，pH为5.9;

步骤（3）生根培养：将步骤（2）继代培养长至7cm的不定芽分切并接种到生根培养基上进行诱导生根，接种后先在25～28℃条件下全暗培养8天，然后置于每天光照18小时，光照强度为3000lx，培养温度为28℃的条件下培养至生根；生根培养基为：1/2MS+0.8mg/LIBA+2.3mg/L GGR+33g/L蔗糖+6.3g/L琼脂，pH为5.9。

步骤（4）,炼苗移栽：将长至11cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗10天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由泥炭土:农家肥:河沙(8：2：2）混合成的基质中并定植于大田中。