[发明专利]由人类滋养层干细胞生成神经干细胞

权利要求书

1.一种经分离的人神经干细胞，其表达尾型同源框2(Cdx2)、Nanog、神经原素-3(NgN3)、视黄酸受体β(RARβ)、类视黄醇X受体α(RXRα)、类视黄醇X受体β(RXRβ)、视黄醛脱氢酶2(RALDH-2)及视黄醛脱氢酶3(RALDH-3)，其中所述经分离的人神经干细胞与经分离的滋养层干细胞相比，具有较低水平或者不存在CD33或CD133细胞表面蛋白表达。

2.如权利要求1所述的经分离的人神经干细胞，其是由从孕龄6-8周的滋养层组织获得的人滋养层干细胞制备得到的。

3.一种筛选用于治疗或预防哺乳动物中神经疾病或病症的化合物的方法，其包括：

a.使如权利要求1或2所述的经分离的人神经干细胞与所述化合物接触；以及

b.检测所述经分离的人神经干细胞中的至少一种基因、转录物或蛋白质的活性的改变。

4.如权利要求3所述的方法，其中与未接触所述化合物的可比较的经分离的人神经干细胞相比，所述人神经干细胞中至少一种基因、转录物或蛋白质的所述活性降低。

5.如权利要求3所述的方法，其中与未接触所述化合物的可比较的经分离的人神经干细胞相比，所述人神经干细胞中的至少一种基因、转录物或蛋白质的所述活性增加。

6.如权利要求3至5之一所述的方法，其中所述神经疾病或病症是帕金森氏症、阿尔兹海默症、亨廷顿氏症、肌萎缩侧索硬化症、弗里德赖希共济失调、路易氏体症、脊髓性肌萎缩、多系统萎缩、痴呆、精神分裂症、麻痹、多发性硬化症、脊髓损伤、脑损伤、脑神经障碍、周边感觉神经病变、癫痫、朊病毒障碍、克雅氏病、阿尔珀斯病、小脑/脊髓小脑退化、巴滕病、皮质基底核退化、贝尔氏麻痹、格林-巴利综合征、皮克病或自闭症。

7.一种制备如权利要求1或2所述的人神经干细胞的方法，其包括：

a.使人滋养层干细胞与视黄酸接触；

b.在该人滋养层干细胞中调节PIP2或者一种或多种蛋白质，其中该一种或多种蛋白质包括：Wnt2B、Fzd6、Dvl3、FRAT1、GSK3β、HDAC6、β-联蛋白、Gα_q/11、Gβ、RXRα、RARβ、GLuR1、PI3K、AKt1、AKt2、AKt3、mTOR、EIF4EBP、CREB1、TH(酪氨酸羟化酶)、PLC-β、CaMKII、EIF4B、帕金蛋白、SNCA、微管蛋白、钙依赖磷酸酶、CRMP-2、NFAT1、输入蛋白、LEF1、Pitx2、MEF2A或EP300。

8.如权利要求7所述的方法，其中该人神经干细胞具有下列表型：多巴胺生成细胞、多巴胺能神经元、单极神经元、双极神经元、多极神经元、谷氨酰胺能神经元、5-羟色胺能神经元、GABA能(γ-氨基丁酸)神经元、锥体细胞、浦肯野细胞、前角细胞、篮状细胞、贝茨细胞、闰绍细胞、颗粒细胞、GRP细胞、NRP细胞、MNS细胞、AST细胞、TGC细胞或中等棘细胞。

9.如权利要求7或8所述的方法，其中所述人神经干细胞具有一种或多种神经元特性，所述神经元特性包括：多巴胺、谷氨酸NMDA受体的亚基、突触蛋白I、α-钙通道标记、GAP-43、电压依赖的K+通道、电压依赖的Ca+通道或电压依赖的Na+通道的表达。

10.一种包含如权利要求1或2所述的经分离的人神经干细胞的药物，其用于治疗有此需要的人类个体中的神经病症。

11.如权利要求10所述的药物，其中所述神经病症为帕金森氏症、阿尔兹海默症、亨廷顿氏症、肌萎缩侧索硬化症、弗里德赖希共济失调、路易氏体症、脊髓性肌萎缩、多系统萎缩、痴呆、精神分裂症、麻痹、多发性硬化症、脊髓损伤、脑损伤、脑神经障碍、周边感觉神经病变、癫痫、朊病毒障碍、克雅氏病、阿尔珀斯病、小脑/脊髓小脑退化、巴滕病、皮质基底核退化、贝尔氏麻痹、格林-巴利综合征、皮克病或自闭症。

12.一种制备人神经干细胞的方法，其包括将经分离的人滋养层干细胞与视黄酸接触，其中所述经分离的人滋养层干细胞得自孕龄6-8周的滋养层组织，其中所述人神经干细胞表达尾型同源框2(Cdx2)、Nanog、神经原素-3(NgN3)、视黄酸受体β(RARβ)、类视黄醇X受体α(RXRα)、类视黄醇X受体β(RXRβ)、视黄醛脱氢酶2(RALDH-2)及视黄醛脱氢酶3(RALDH-3)，并且其中所述经分离的人神经干细胞与所述经分离的滋养层干细胞相比，具有较低水平或者不存在CD33或CD133细胞表面蛋白表达。