[发明专利]人YTHDF1基因的用途

说明书

本发明公开了人YTHDF1基因的新用途，即将人YTHDF1基因表达量检测试剂应用在制备肺癌临床诊断试剂中，及将人YTHDF1基因应用在制备治疗肺癌药物中，与正常肺上皮细胞相比，YTHDF1基因在肺癌细胞中高表达，针对YTHDF1基因设计的RNA干扰慢病毒，抑制YTHDF1表达，能显著抑制肺癌细胞的增殖、使肿瘤细胞分裂阻滞在G0/G1期，促进细胞的凋亡、抑制裸鼠移植肿瘤的形成，进而能达到治疗肺癌的目的，YTHDF1基因敲除小鼠成瘤能力检测实验显示细胞增殖受到显著抑制，细胞的凋亡明显上升；表明人YTHDF1基因可以作为肺癌治疗的靶点，为将来基于YTHDF1基因的肺癌治疗药物的开发提供广阔的前景。

技术领域

本发明涉及一种基因的新用途，尤其是人YTHDF1基因的新用途。

背景技术

后天修饰有甲基化、乙酰化和泛素化等。RNA修饰是后天修饰的一种。迄今为止，不同的细胞内RNA如tRNA、rRNA、mRNA和长链非编码RNA等已经发现了100多种化学修饰。而20世纪70年代发现的N6-methyladenosine是细胞内mRNA及长链非编码RNA最常见的修饰类型，且从病毒到酵母，乃至哺乳动物都广泛存在。最近的研究表明m6A修饰异常可导致大脑发育异常和其他疾病,包括癌症。RNA结合蛋白(RNA-binding proteins)是转录后处理过程中的关键因素,它调节RNA的拼接、稳定性、定位和翻译,许多RBPs在不同的癌症类型中异常表达,导致癌基因蛋白和肿瘤抑制因子的功能障碍。

参加m6A甲基化的酶一共有三大类酶，分别是Writers、Erasers和Readers。Writers是指在从DNA→RNA过程中的甲基化酶METTL3、METTL14和WTAP等，在它们的作用下腺苷酸第六位N发生甲基化修饰。而这些已经发生m6A修饰的碱基，在FTO和ALKBH这两种酶的作用下发生去甲基化，故这类酶称为Erasers。其中FTO可与ALKBH5一起，使得RNA甲基化成为一种可逆的反应。最后这些发生甲基化修饰的RNA碱基位点，需要特定的酶即readers来识别。已知YTHDF家族包括YTHDF1、YTHDF2、YTHDF3以及酿酒酵母中的Mrb1基因、粟酒裂殖酵母中的Mmi1基因都是readers类蛋白。这些酶能够识别发生m6A甲基化的碱基，参与下游翻译、mRNA降解、加快mRNA出核速度等作用。

m6A修饰及其相关的调控蛋白在多种肿瘤起着关键的作用。美国安德森癌症中心黄素云课题组与芝加哥大学何川课题组合作的关于m6A去甲基化酶ALKBH5的重要发现,指出ALKBH5在恶性胶质瘤细胞中起到维持细胞干性的作用，并详细地揭示了ALKBH5介导的FOXM1基因mRNA上的m6A修饰参与了肿瘤细胞干性的维持。

肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。2017年美国最新肿瘤统计表明,肺癌估计的死亡人数为:男性84590例,女性71280例,分别占各类肿瘤死亡的27％和25％,位居各类肿瘤死亡之首。根据生物学特性，肺癌分为小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)。前者约占肺癌的15％～20％,后者约占肺癌的80％～85％。目前肺癌的治疗包括手术切除、以铂类(如顺铂或卡铂)为基础的联合化疗、放疗以及靶向药物治疗等，但临床疗效仍不理想，5年生存率不超过15％，其主要原因是肺癌细胞的发生、发展尚不完全清楚。

因此，探索肺癌发生、发展过程中新的关键分子对明确肺癌发生的分子机制以及以此为靶点进行靶向治疗具有重要意义,有助于提高肺癌患者的生存率,改善其生存质量。

发明内容

本发明的目的在于提供人YTHDF1基因的新用途，即将人YTHDF1基因表达量检测试剂应用在制备肺癌临床诊断试剂中；将人YTHDF1基因表达量检测结果作为肺癌病人临床治疗的依据。

检测人YTHDF1基因表达量是利用人YTHDF1基因序列设计人YTHDF1的mRNA的引物序列，并通过实时定量PCR法检测人YTHDF1的mRNA的水平；所述mRNA的引物序列为：