[发明专利]一种抗人胃蛋白酶原II的重组抗体

说明书

本发明涉及一种抗人胃蛋白酶原II的重组抗体，并对该重组抗体的制备、应用等方面进行研究。所述结合蛋白活性强，与人PG II蛋白具有很高的亲和力，可广泛应用于PG II蛋白的检测领域。

技术领域

本发明涉及免疫技术领域，具体而言，涉及一种抗人胃蛋白酶原II的重组抗体。

背景技术

胃蛋白酶原(Pepsinogen，PG)是胃液中胃蛋白酶的前体，蛋白分子约为43KD，由300个氨基酸组成。根据生化和免疫活性特征不同，可分为两大亚群PGI(又称PGA)和PGⅡ(又称PGC)，胃蛋白酶原A(PGA)来源于胃底腺的主细胞和颈粘液细胞，胃蛋白酶原C(PGC)来源于全胃腺(胃喷门腺、胃底腺、胃窦幽门腺)和远端十二指肠Brunner氏腺，前列腺和胰腺也产生少量的PGC，胃粘膜合成的PGC约为总量的25％，合成后的PG大部分进入胃腔，在酸性胃液作用下活化成胃蛋白酶，只有少量的(约1％)PG透过胃粘膜毛细血管进入血循环，进入的量十分稳定，因此血清PG浓度可以反映胃粘膜腺体的分泌水平。也间接反映了胃粘膜不同部位的分泌功能。当胃粘膜发生病理变化时，血清PG含量也随之改变，被称为胃粘膜的“血清学活检”。

正常人血液中PGⅠ的含量为60.6±13.9ng/ml；PGⅡ的含量为11.9±4.2ng/ml，PGⅠ/PGⅡ比值5.52±1.86。国内外临床研究指出，PGⅡ与胃底粘膜病变的相关性较大，其升高与胃底腺管萎缩、肠上皮化生或假幽门腺化生、异型增生有关。测定PGⅡ含量有助于检测出十二指肠溃疡、萎缩性胃炎、胃癌等其他消化道疾病，供临床检测和体检筛查需求。在人群胃病筛查中，每个人做胃镜检查是不现实的，可以通过非侵入性血清PG检测将浅表性胃炎、糜烂性胃炎、胃溃疡、十二指肠溃疡、胃癌等高危人群筛查出来，再进行胃镜检查是一种切实可行的方案，PGI/PGII比值是胃癌筛查的重要指标之一，PGⅡ检测作为非侵入性方法，可降低患者痛苦，简便、经济，具有普查价值。

临床上用于检测水平PGⅡ的方法有酶联免疫吸附法(ELISA)，化学发光法，流式荧光发光法，时间分辨荧光免疫分析法，光激化学发光免疫分析法，胶体金等，不同方法都有各自的优缺点，但是都需要针对于PGⅡ的特异性单克隆抗体。

现有的抗人PGⅡ抗体由于活性低、亲和力差，无法很好地应用于PGⅡ蛋白的检测中，因此本领域对于有效且特异性结合检测PGⅡ并对其进行检测的抗体存在着强烈需求。

发明内容

本发明涉及一种新颖的包含PG II抗原结合结构域的分离的结合蛋白，并对该结合蛋白的制备、应用等方面进行研究。

所述抗原结合结构域包括选自下述氨基酸序列的至少一个互补决定区；或；与下述氨基酸序列的互补决定区具有至少80％的序列同一性且与胃蛋白酶原II具有K_D≤1.74×10^-8mol/L的亲和力；

互补决定区CDR-VH1为G-Y-X1-F-T-X2-H-X3-M-N，其中，

X1是S或T，X2是Q或N，X3是G或A；

互补决定区CDR-VH2为I-N-X1-F-T-X2-Q-P-T-X3-A-D-D-F，其中，

X1是T或S，X2是A或G，X3是F或Y；

互补决定区CDR-VH3为R-G-X1-N-Y-X2-Y-Y-X3-A-M-D-Y，其中，

X1是E或D，X2是I或L，X3是Y或F；

互补决定区CDR-VL1为Q-S-X1-A-X2-S-Y-G-N-T-Y-X3-S，其中，

X1是I或L，X2是N或Q，X3是L或I；

互补决定区CDR-VL2为G-X1-S-X2-R-F-S，其中，

X1是I或L，X2是Q、D或N；