[发明专利]一种抗菌剂毒性的检测方法有效
申请号: | 201811418355.7 | 申请日: | 2018-11-26 |
公开(公告)号: | CN109324180B | 公开(公告)日: | 2020-12-25 |
发明(设计)人: | 童中华;崇汉娟 | 申请(专利权)人: | 中国科学技术大学 |
主分类号: | G01N33/50 | 分类号: | G01N33/50 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 张雪娇;赵青朵 |
地址: | 230026 安*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 抗菌剂 毒性 检测 方法 | ||
1.一种抗菌剂毒性的检测方法,其特征在于,包括:
使秀丽线虫暴露于待测样品中,根据秀丽线虫的身体长度、身体弯曲频率、头部摆动频率、后代数、孵化时间、世代时间和种群规模评价抗菌剂对生长发育、神经系统和生殖系统的毒性;所述待测样品含有抗菌剂;所述待测样品中抗菌剂的浓度为0~0.5mg/L;所述抗菌剂为三氯卡班;
根据秀丽线虫的身体长度评价抗菌剂对生长发育的毒性时,将L1期秀丽线虫暴露于待测样品中3天;
根据秀丽线虫的身体弯曲频率与头部摆动频率评价抗菌剂对神经系统的毒性时,将L1期秀丽线虫暴露于待测样品中3天;
所述后代数具体按照以下步骤得到:将L1期秀丽线虫在待测样品中暴露于60h,生长至成虫期后,将秀丽线虫转移至固体培养基中,24h后计数,并将成虫转移至新的固体培养基中,重复上述操作,直至秀丽线虫不再产卵,得到总数为后代数;
所述孵化时间与世代时间具体按照以下步骤得到:将L1期秀丽线虫在待测样品中暴露4天,然后使用NaOH与NaClO溶液对虫子进行处理得到卵,从得到卵到卵孵化成L1秀丽线虫的时间为孵化时间;从得到卵到卵发育成成虫开始产卵的时间为世代时间;
所述种群规模具体按照以下步骤得到:将L4期秀丽线虫暴露于待测样品中5天,进行培养,记录秀丽线虫总数;
所述评价抗菌剂对生长发育的毒性为所述秀丽线虫的体长小于1.14mm;
所述评价抗菌剂对神经系统的毒性为秀丽线虫的身体弯曲频率低于9.6次/20秒;头部摆动频率低于120.6次/min;
所述评价抗菌剂对生殖系统的毒性为后代数低于175条;世代时间大于87h;孵化时间延迟大于4h,相同时间的孵化率减少5%以上;种群规模减少38%以上。
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