[发明专利]一种缩短水稻生育期的育种方法

权利要求书

1.一种缩短水稻生育期的育种方法，其特征为，选择一个早开花/抽穗的基因，在所述基因的启动子序列中定点插入一个增强子序列促使所述早开花/抽穗基因的表达量增加，并缩短水稻的生育期。

2.根据权利要求1所述的一种缩短水稻生育期的育种方法，所述增强子序列为35S增强子(SEQ ID NO:25)。

3.根据权利要求1所述的一种缩短水稻生育期的育种方法，所述增强子通过CRISPR/Cas技术介导，定点插入到所述早开花/抽穗基因的启动子序列中。

4.根据权利要求3所述的一种缩短水稻生育期的育种方法，其特征为，所述育种方法的具体步骤为：

1)选择一个早开花/抽穗基因，设计靶向所述早开花/抽穗基因启动子的sgRNA，并构建体CRISPR/Cas载体；

2)选择定点插入位点，克隆靶点附近的同源重组臂，构建体含有35S增强子的载体；

3)将所述步骤1)和2)的载体转化农杆菌，并以培养好的两种农杆菌菌液混合共同转化水稻愈伤组织；

4)培养步骤3)获得的转化水稻幼苗，并进行PCR鉴定，得到生育期缩短的水稻植株。

5.根据权利要求4所述的一种缩短水稻生育期的育种方法，所述早开花/抽穗基因为OsUSP1(SEQ ID NO：2)，所述早开花/抽穗基因OsUSP1基因的启动子序列如SEQ ID NO：1所示。

6.根据权利要求5所述的一种缩短水稻生育期的育种方法，所述sgRNA的核苷酸序列包括SEQ ID NO：3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或21。

7.根据权利要求5所述的一种缩短水稻生育期的育种方法，所述sgRNA的核苷酸序列包括SEQ ID NO：8，SEQ ID NO：9或SEQ ID NO：14。

8.根据权利要求3所述的一种缩短水稻生育期的育种方法，所述步骤2)中同源重组臂的长度为700-800bp。

9.根据权利要求8所述的一种缩短水稻生育期的育种方法，所述同源重组臂的序列为SEQ ID NO:26和27。