[发明专利]从油橄榄叶中同步分离纯化橄榄苦苷和羟基酪醇的方法

说明书

本发明提供一种从油橄榄叶中同步分离纯化橄榄苦苷和羟基酪醇的方法，是将油橄榄叶用水浸泡回流提取，提取液浓缩后作为上样液；将正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水混合均匀后，静置分层；然后将上相溶液、下相溶液分开，分别作为洗脱液；上样液经过大孔树脂吸附，吸附完毕后树脂柱先用水洗掉水溶性杂质并弃掉洗涤液；再用下相洗脱液洗脱，收集流出液；最后用上相洗脱液洗脱，收集流出液。橄榄苦苷主要在上相洗脱液中，羟基酪醇主要在下相洗脱液中。本发明提取液经一次树脂处理后，橄榄苦苷的含量达到45%以上，回收率达到90%以上；羟基酪醇的含量达到3%左右，回收率达到85%以上。

技术领域

本发明涉及一种从油橄榄叶中同步分离纯化橄榄苦苷和羟基酪醇的方法，属于天然产物分离技术领域。

背景技术

油橄榄（Oleaeuropaea L.）作为一种经济作物，起初主要种植在地中海沿岸的希腊、意大利等国，后引入我国，主要分布在云南、四川、甘肃、贵州等地。橄榄叶是橄榄种植业的主要副产品，每年在修剪和收获水果时都会被丢弃。这不仅污染环境，还会造成资源的严重浪费。因此，对油橄榄叶进行综合利用开发，是十分必要的。

油橄榄叶中活性物质主要有多酚类、黄酮类、裂环烯醚萜类、双黄酮等，其中橄榄苦苷（Oleuropein，OL）和羟基酪醇（Hydroxytyrosol，HT）是两种主要的多酚类化合物。根据文献报道，橄榄苦苷和羟基酪醇具有良好的抗氧化作用，可以有效的清除自由基和氧化物，被认为是天然的抗氧剂之一。此外，橄榄苦苷还具有抗真菌、抗病毒、抗癌和降血糖的作用；羟基酪醇具有预防动脉硬化、高血压、脑溢血，降血压、抗癌防癌等作用。因此，含有橄榄苦苷和羟基酪醇的提取物有望成为保健品、药品、化妆品的新原料。目前，从油橄榄叶中同时分离纯化橄榄苦苷和羟基酪醇的工艺方法未见报道。

发明内容

本发明提供一种从油橄榄叶中同步分离纯化橄榄苦苷和羟基酪醇的方法，从而弥补现有技术的不足。

本发明同步分离纯化橄榄苦苷和羟基酪醇的方法，包括以下步骤：

（1）提取：油橄榄叶为原料，用水回流提取两次，混合，冷却，过滤，浓缩至浓度为每升相当于0.05~0.2kg油橄榄叶，此溶液作为上样液；油橄榄叶与水按1:5~1:20的固液质量比进行回流提取，每次提取时间为1.5~2h。

（2）洗脱剂的配制：将正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水混合均匀后，静置分层；然后将上相溶液、下相溶液分开，分别作为洗脱液；正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为1:（8~10）:（1~2）:（8~10）。

（3）大孔树脂分离纯化：上样液经过大孔树脂吸附，吸附完毕后树脂柱先用水洗掉水溶性杂质并弃掉洗涤液；再用下相洗脱液洗脱，收集流出液；最后用上相洗脱液洗脱，收集流出液。橄榄苦苷主要在上相洗脱液中，羟基酪醇主要在下相洗脱液中。

大孔树脂选自苯乙烯基质大孔树脂，如D101、LSA-21、HPD450、LSA-40、LSD001、HPD600，树脂柱的径高比为1:5~1:20。

上样液的体积为3 BV~15 BV，流速为2 BV/h~20 BV/h；下相洗脱液的体积为3 BV~8 BV，流速为2 BV/h ~5 BV/h；上相洗脱液的体积为3 BV~8 BV，流速为3 BV/h~8 BV/h。

本发明提取液经一次树脂处理后，橄榄苦苷的含量达到45%以上，回收率达到90%以上；羟基酪醇的含量达到3%左右，回收率达到85%以上。

本发明相对于现有技术具有以下优点：

1、本发明通过一步将橄榄苦苷和羟基酪醇分离开，得到高纯度橄榄苦苷和较高纯度的羟基酪醇，可用作抗衰老、降血压、降血糖、防癌抗癌类药物、保健食品和化妆品的原料；

2、生产过程中使用绿色溶剂，环境友好、工艺路线简单，成本低、效率高，适用于工业生产；