[发明专利]一种提取肉类核酸的裂解液及方法

说明书

本发明公开了一种提取肉类核酸的裂解液和方法。裂解液由氯化钠、十二烷基磺酸钠、乙基苯基聚乙二醇和聚乙烯吡咯烷酮溶于水混合得到；各组分在混合液中的浓度分别为：氯化钠：0.2～1.5M，十二烷基磺酸钠：0.01～1g/ml，乙基苯基聚乙二醇：0.01～0.5g/ml，聚乙烯吡咯烷酮：0.01～0.1g/ml。方法为：将剁碎的肉类样品，在常温下与裂解液进行混匀，静置一段时间；再离心分离，取上清液，即得到核酸提取物。本发明的裂解液成本低且无毒，提取方法可以实现肉类核酸的快速提取，操作过程简单易行，并可应用于PCR或LAMP扩增体系进行检测。

技术领域

本发明属于食品安全监测技术领域，特别是涉及一种提取肉类核酸的裂解液及方法。

背景技术

目前，市场上许多不良商家为了获取经济利益，经常用廉价肉来代替高价肉，严重损害了消费者权益。由于一些种类相近的肉(如猪肉与牛肉、羊肉与牛肉)之间外表区分度不大，普通消费者光靠肉眼很难进行鉴别。为了实现对肉的种类进行鉴别，比较常用的方法是利用PCR或LAMP反应对肉中特有的核酸序列进行扩增检测。然而在扩增前，需要对肉的核酸进行提取。

传统的肉类核酸提取方法有很多，如酚-三氯甲烷法、CTAB法、PVP法、硅土法、胍-三氯甲烷法等。这些方法有的需要加热，有的操作耗时很长，而且操作步骤较多，过程较繁琐，大大降低了核酸提取效率，不利于实现核酸的快速提取以及快速检测。

为了加快对肉类的核酸提取，已有一些报道关于肉类核酸的提取方法，如采用Tris-EDTA法，改良CTAB法，强碱法，尿素法等，这些方法尽管较传统检测方法简化了操作步骤和流程，但是操作耗时仍然较长，且有一些试剂具有一定的毒性，对人体具有一定的危害。市场上也有许多肉类核酸提取试剂盒(离心柱型)，但一般都需要加热对肉裂解1小时以上，且所需试剂与操作步骤较多，成本较高。因此，开发一种简单、常温、无毒、快速的肉类核酸提取方法并应用于肉类核酸快速检测具有重要意义。

综上所述，基于现有技术的缺陷以及实际需求，本发明开发了一种提取肉类核酸的裂解液及方法，本发明的裂解液无毒且成本低，使用该裂解液进行肉类提取的方法具有操作简单、提取过程快速等优点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提取肉类核酸的裂解液及方法。本发明的裂解液成本低且无毒，提取方法可以实现肉类核酸的快速提取，操作过程简单易行，并可应用于PCR或LAMP扩增体系进行检测。

为了达到上述的目的，本发明采取以下技术方案：

一种提取肉类核酸的裂解液，该裂解液由氯化钠、十二烷基磺酸钠、乙基苯基聚乙二醇和聚乙烯吡咯烷酮溶于水混合得到；各组分在混合液中的浓度分别为：

氯化钠：0.2～1.5M，

十二烷基磺酸钠：0.01～1g/ml，

乙基苯基聚乙二醇：0.01～0.5g/ml，

聚乙烯吡咯烷酮：0.01g/ml～0.1g/ml。

进一步地，上述裂解液中，优选的，氯化钠的浓度为0.3～1M；更优选的，氯化钠的浓度为0.4～0.6M。

进一步地，上述裂解液中，优选的，十二烷基磺酸钠的浓度为0.1～0.8g/ml，更优选的，十二烷基磺酸钠的浓度为0.3～0.6g/ml。

进一步地，上述裂解液中，优选的，乙基苯基聚乙二醇的浓度为0.05～0.2g/ml；更优选的，乙基苯基聚乙二醇的浓度为0.08～0.1g/ml。

进一步地，上述裂解液中，优选的，聚乙烯吡咯烷酮的浓度为0.03～0.08g/ml；更优选的，聚乙烯吡咯烷酮的浓度为0.05g/ml～0.06g/ml。