[发明专利]制备红景天苷的方法和试剂盒有效
申请号: | 201811425601.1 | 申请日: | 2018-11-27 |
公开(公告)号: | CN109694892B | 公开(公告)日: | 2021-03-23 |
发明(设计)人: | 王洪钟;董银卯;黄爱清;何聪芬;张贵友 | 申请(专利权)人: | 北京工商大学;清华大学 |
主分类号: | C12P19/44 | 分类号: | C12P19/44;C12P19/18 |
代理公司: | 北京德琦知识产权代理有限公司 11018 | 代理人: | 潘怀仁;王珍仙 |
地址: | 100048*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 制备 红景天 方法 试剂盒 | ||
1.一种制备红景天苷的方法,其包括:
将蔗糖磷酸化酶、纤维二糖磷酸化酶、蔗糖、酪醇和磷酸混合,得到反应混合物,然后,在40℃至55℃的温度下转化,而产生红景天苷。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述温度为50℃。
3.根据权利要求1所述的方法,其中,所述蔗糖磷酸化酶为重组耐热蔗糖磷酸化酶。
4.根据权利要求3所述的方法,其中,所述重组耐热蔗糖磷酸化酶的DNA序列和氨基酸序列分别为SEQ ID No:1和SEQ ID No:2所显示。
5.根据权利要求4所述的方法,其中,所述纤维二糖磷酸化酶为重组耐热纤维二糖磷酸化酶。
6.根据权利要求5所述的方法,其中,所述重组耐热纤维二糖磷酸化酶的DNA序列和氨基酸序列分别为SEQ ID No:3和SEQ ID No:4所显示。
7.根据权利要求6所述的方法,其中,所述反应混合物中,所述重组耐热蔗糖磷酸化酶的酶活性浓度为250U/L至600U/L,并且所述重组耐热纤维二糖磷酸化酶的酶活性浓度为1200U/L至1600U/L。
8.根据权利要求7所述的方法,其中,所述重组耐热蔗糖磷酸化酶的酶活性浓度为500U/L,并且所述重组耐热纤维二糖磷酸化酶的酶活性浓度为1500U/L。
9.根据权利要求1所述的方法,其中,所述反应混合物中,所述蔗糖的浓度为20g/L至150g/L。
10.根据权利要求1所述的方法,其中,所述蔗糖的浓度为110g/L。
11.根据权利要求1所述的方法,其中,所述反应混合物中,所述酪醇的浓度为20g/L至50g/L。
12.根据权利要求1所述的方法,其中,所述反应混合物中,所述酪醇的浓度为42g/L。
13.根据权利要求1所述的方法,其中,所述反应混合物中,所述磷酸的浓度为20mmol/L至60mmol/L。
14.根据权利要求1所述的方法,其中,所述反应混合物中,所述磷酸的浓度为50mmol/L。
15.根据权利要求1所述的方法,其中,所述反应混合物进一步包括20mmol/L至100mmol/L,pH值为6.0至9.0的柠檬酸缓冲液。
16.根据权利要求1所述的方法,其中,所述反应混合物进一步包括40mmol/L,pH值为7.0的柠檬酸缓冲液。
17.根据权利要求1所述的方法,其中,所述转化的时间为10小时至36小时。
18.根据权利要求1所述的方法,其中,所述转化的时间为24小时。
19.一种制备红景天苷的试剂盒,其包括蔗糖磷酸化酶、纤维二糖磷酸化酶、蔗糖、酪醇和磷酸,所述试剂盒用于根据权利要求1至18中任一项所述的方法制备红景天苷。
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