[发明专利]一种淀粉蔗糖酶突变体及其制备方法与应用有效

专利信息
申请号: 201811426701.6 申请日: 2018-11-27
公开(公告)号: CN109402081B 公开(公告)日: 2021-08-20
发明(设计)人: 吴敬;宿玲恰;郭志勇;祝晓蕾;徐星豪 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N9/10 分类号: C12N9/10;C12N15/56;C12P19/04
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 张勇
地址: 214000 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 淀粉 蔗糖 突变体 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种淀粉蔗糖酶突变体,其特征在于,对Neisseria polysaccharea来源的淀粉蔗糖酶第295位丙氨酸进行突变,所述来源于Neisseria polysaccharea的淀粉蔗糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示,所述突变是将氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的第295丙氨酸残基变为丝氨酸残基,突变体命名为A295S。

2.编码权利要求1所述淀粉蔗糖酶突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的载体。

4.携带权利要求2所述基因的重组细胞。

5.制备权利要求1所述淀粉蔗糖酶突变体的方法,其特征在于,包括如下步骤:

(1)在淀粉蔗糖酶氨基酸序列上确定突变位点;设计定点突变的突变引物,以携带淀粉蔗糖酶基因的载体为模板进行定点突变;构建含突变体的质粒载体;

(2)将突变体质粒转化进宿主细胞;

(3)挑选阳性克隆进行发酵培养,分别纯化淀粉蔗糖酶突变体A295S。

6.根据权利要5所述的方法,其特征在于,所述质粒载体为pUC系列,pET系列,或pGEX中的任意一种。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述宿主细胞为细菌或真菌细胞;所述的细菌为革兰氏阴性菌或革兰氏阳性菌。

8.权利要求1所述的淀粉蔗糖酶突变体在生产多聚糖中的应用。

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