[发明专利]7-吡唑胺-[1,2,4]三氮唑并[1,5-a]嘧啶类化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种7‑吡唑胺‑[1,2,4]三氮唑并[1,5‑a]嘧啶类化合物，结构式为其中，所述结构式中的基团R₁代表氢原子或含硫取代基；基团R₂代表氢原子或烷基；基团R₃代表含取代基的吡唑胺基团。本发明还提供一种上述嘧啶并1,2,4‑三氮唑类BRD4抑制剂的制备方法和应用。上述7‑吡唑胺‑[1,2,4]三氮唑并[1,5‑a]嘧啶类化合物具有嘧啶环并1,2,4‑三氮唑的结构单元，该类化合物可以用于以BRD4为靶点的抗肿瘤药物中，为寻找针对BRD4为靶点的新型抗肿瘤药物开辟新途径。另外，本发明提供的7‑吡唑胺‑[1,2,4]三氮唑并[1,5‑a]嘧啶类化合物的合成方法可行，收率高。

技术领域

本发明属于药物化学领域，具体涉及一种7-吡唑胺-[1,2,4]三氮唑并[1,5-a]嘧啶类化合物及其制备方法，以及其在制备以BRD4为靶点的抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

BRD4属于BET蛋白家族中的一种，具有两个BRD区域，BRD4底物广泛，可以识别多种组蛋白赖氨酸的乙酰化修饰，也对多种非组蛋白赖氨酸的乙酰化具有识别作用，其主要底物有H3K9ac，H3K27ac，H3K14ac和H4K5ac，H4K16ac，参与多种生物学功能，对多种疾病的发生有重要作用。由于BRD4底物广泛，可以与多种蛋白相互作用参与多种生物功能，因此BRD4参与多种疾病的发生和发展过程。

在血液系统肿瘤中，BRD4是参与AML的一个关键蛋白，用BRD4抑制剂JQ-1 处理AML细胞系后，BRD4对下游c-Myc基因启动子区域的结合减少，并减少其表达量，抑制c-Myc下游基因表达，并可以在体内延缓肿瘤发展，延长生存期。这种作用在其他类型血液肿瘤中也被发现。BRD4抑制剂也可以增强其他抗肿瘤药物如阿糖胞苷在血液肿瘤中的抗肿瘤活性。在MLL融合型白血病中，BRD4抑制剂I-BET762和 I-BET151可以有效抑制c-Myc和下游基因表达，在小鼠移植模型中具有很强抗肿瘤作用。急性淋巴细胞白血病对BRD4抑制剂也有应答，且可以与地塞米松联用加强其作用。在多发性骨髓瘤MM中，BRD4抑制剂可以抑制c-Myc转录，诱导细胞周期在G1 期阻滞，诱导细胞衰老，并且在体内也有很好抑制肿瘤作用；在淋巴瘤中，BRD4抑制剂可以抑制不同起源的淋巴瘤细胞的生长。BET抑制剂可以在弥散型B细胞淋巴瘤模型中具有很强抑制肿瘤的作用。

在实体瘤中，BRD4也具有重要作用。BRD4在睾丸线癌中的作用是第一次发现 BRD4在实体瘤中的作用。BRD4的BRD编码区可与NUT基因染色质易位形成 BRD-NUT融合型原癌基因，表达的融合蛋白招募HAT蛋白，导致组蛋白高度乙酰化，上调c-Myc及其下游基因表达，抑制细胞分化，引起线癌的发生。NMC移植模型中， BRD4抑制剂可有效抑制肿瘤生长，延长生存期。BRD4在肺腺癌中也异常表达，BRD4 抑制剂在肺腺癌细胞移植瘤模型中影响BRD4/NF-κB的相互作用，在非小细胞肺癌中， BRD4抑制剂影响c-Myc表达，并且主要参与在野生型LKB的KRAS突变体中。在前列腺癌和乳腺癌的发生中，BRD4的抑制剂可以下调c-Myc和BCL2的表达，抑制肿瘤细胞生长。BRD4还可以和BRD3与雌激素受体启动子结合，影响下游雌激素靶基因表达，这种作用可以被BRD4抑制剂阻止，抑制乳腺癌肿瘤细胞生长，与ER去稳定剂氟维司群联用可加强抗肿瘤作用。在体内，BRD4抑制剂也表现出很强的抑制乳腺肿瘤生长的作用。在恶性胰腺癌细胞中，c-Myc，HMGA2和FOSL1的表达可以被 BRD4抑制剂调节，影响肿瘤生长。BRD4在许多原发或者转移性的黑色素瘤中过度表达，BRD4抑制剂MS417和MS436可以在不同黑色素瘤细胞中表现较强的抗恶性肿瘤细胞增生的作用，下调c-Myc的表达，上调p21和p27表达；MS417可以在A375 黑色素细胞移植瘤中抑制肿瘤生长，减少肿瘤细胞转移；还可以下调NF-κB，影响多种基因转录表达。BRD4在恶性胶质瘤中和成神经细胞瘤也过度表达，c-Myc和BCL2 的表达可以被JQ1下调从而减少常位恶性胶质瘤的增殖，也可以上调p21表达，诱导细胞凋亡，在不同种成神经细胞瘤小鼠移植模型中，JQ1可有效减小肿瘤体积，延长生存期。下调MYCN、c-Myc和BCL2的表达。