[发明专利]一种生物型骨膜修复材料及其制备方法

说明书

本发明涉及一种生物型骨膜修复材料及其制备方法，具体涉及一种脱细胞基质材料及其制备方法和在骨膜修复中的应用。该制备方法包括：(1)取猪小肠空肠段，清洗，径向切开，去除粘膜层、肌膜层、浆膜层，获得猪小肠粘膜下层组织膜；(2)将步骤(1)所得猪小肠粘膜下层组织膜依次进行如下处理：先置于过氧乙酸溶液中浸泡，清洗；再置于氢氧化钠溶液中浸泡，清洗；最后再置于丙酮溶液中浸泡，清洗，获得猪小肠粘膜下层组织脱细胞基质。本发明生物安全性高，免疫原性和细胞毒性低；生物相容性好，能促进黏附其上的细胞的增殖，适于用作生物修复材料，特别适合用于骨膜修复。

技术领域

本发明涉及组织修复材料技术领域，涉及一种生物型骨膜修复材料及其制备方法，特别是涉及一种脱细胞基质材料及其制备方法和在骨膜修复中的应用。

背景技术

骨膜是由微血管化的致密结缔组织组成的，它通过夏贝氏纤维(Sharpey’sfibers)紧紧地覆盖在皮质骨外表面，形成一层薄而坚韧的膜。骨膜是高度血管化的组织，其中含有成骨和成软骨祖细胞以及其他相关的生物活性因子，而被描述成血管化较好的“骨/软骨器官”，它为骨提供血液循环，被认为是骨的“脐带”，骨膜剥落通常会破坏骨的动脉营养供应。从组织结构上讲，骨膜被分成不同的两层:由成纤维细胞和夏贝氏纤维组成的外层纤维层，以及含有多能间充质干细胞和骨母细胞的内层生发层，这些细胞有助于正常骨的生长、愈合和再生。近年来，随着社会工业化程度提高，由创伤、肿瘤切除、病理变性等原因造成的骨损伤和骨膜缺损日益增多。就传统的骨移植手术治疗骨缺损而言，存在着诸多问题。同时自体和异体骨膜移植已经用于各种尺寸的骨缺损修复，但是骨膜移植仍然存在供体不足、供区并发症和免疫学问题，就骨的生理机能而言，除了其他重要因素的参与，骨膜在骨形成和缺损治疗中起到了决定性的作用。如何能够更好地解决骨膜缺损修复是一个临床难题。

细胞外基质(ECM)是围绕身体几乎所有组织中的细胞结构和功能性物质，属于天然的生物材料，ECM经过机械法、化学法、酶法等方法，除去原组织中的DNA及细胞，再通过交联、消毒等处理后制备而成，它是一种具有一定的机械强度、低免疫原性的动物源性生物材料。其中，胶原蛋白是天然活组织中的主要结构框架，是ECM中最丰富的蛋白质。ECM被视为一种支持结构，细胞在其上对其他细胞进行定向和移动。ECM还提供了组织修复所需的微孔结构和环境。由于ECM是组织维持所必需的，它在组织修复中也起着重要作用。没有功能性ECM，修复就会停止，因为ECM不再能够支持正常的细胞过程。

ECM已经广泛应用于现代生物医学领域，如肌腱重建、下泌尿道重建、硬脑膜修补、血管重建、修复部分或全层皮肤损伤、生物疝修补，抗粘连和骨修复引导膜等方面。

例如；有一些研究者制备了人工骨膜，如，Clavin N等人采用人脱细胞真皮和成骨细胞/间充质干细胞(MSCs)合成了骨膜样材料。Hoffman等人利用可降解的水凝胶将间充质干细胞传递和集中到异体移植物表面来制备骨膜类似物。但是这些研究尚处于早期研究阶段，且没有过多考虑到生物安全性与实用性的问题。

目前，鉴于骨膜在骨修复中的重要作用，并且，尚无有效针对修复骨膜来达到治疗骨缺损的产品。因此，亟待提供一种生物相容性好的脱细胞基质材料作为生物骨膜来治疗骨缺损。

发明内容

基于此，本发明的主要目的是提供一种生物型骨膜修复材料及其制备方法。该制备方法所得脱细胞基质材料具有非常好的生物相容性，特别是能够很好的促进黏附其上的骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖，所以非常适合用于骨膜修复。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种脱细胞基质材料的制备方法，所述的制备方法包括：

(1)取猪小肠空肠段，清洗，径向切开，去除粘膜层、肌膜层、浆膜层，获得猪小肠粘膜下层组织膜；

(2)将步骤(1)所得猪小肠粘膜下层组织膜依次进行如下处理：