[发明专利]一种杏仁树组培快繁方法

说明书

本发明公开了一种杏仁树组培快繁方法，杏仁又名杏实，主产内蒙古、吉林、辽宁、河北等地，夏季采收成熟果实，除去果肉及壳，取种子晒干。杏仁含多种维生素及钙、磷、铁等营养成分；含有丰富的脂肪油，有降低胆固醇的作用。目前杏仁树主要采用扦插、嫁接和播种等传统方式进行育苗，存在育苗成本高，苗木长势不好、参差不齐、良种潜力未能得到充分发挥等缺点。本发明以优良无性系嫩枝为外植体，通过外植体消毒、诱导培养、丛生芽增殖、不定根发生、炼苗移栽等过程获得了杏仁树离体再植株，建立杏仁树组织培养快速繁殖技术体系，可以保持杏仁树无性系母本的优良性状，有利于杏仁树优良无性系苗木的规模化生产。

技术领域

本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种杏仁树组培快繁方法。

背景技术

杏仁又名杏实，主产内蒙古、吉林、辽宁、河北等地，夏季采收成熟果实，除去果肉及壳，取种子晒干。杏仁含多种维生素及钙、磷、铁等营养成分；含有丰富的脂肪油，有降低胆固醇的作用，可防治心血管系统疾病。近年来随着集体林权制度改革的推进和商品材价格的上涨，林农经营杏仁的积极性加大，杏仁经营水平和良种意识的不断提高，对杏仁树良种壮苗的需求日益增加，因此，如何快速扩繁杏仁优良基因型显得十分必要。近年来生物工程技术的快发展，尤其是组培快繁体系的建立，为林木的无性选育提供了一定的技术支撑。利用组织培养技术进行珍稀濒危物种及优良品系树种繁育，具有加速育种、缩短繁殖过程、节省空间、减少劳动、周年生产等特点。而目前杏仁树主要采用扦插、嫁接和播种等传统方式进行育苗，存在育苗成本高，苗木长势不好、参差不齐、良种潜力未能得到充分发挥等缺点，使得目前杏仁树优质壮苗的供应还无法满足市场的需求。为了满足市场对杏仁树苗的巨大需求，本发明以优良无性系嫩枝为外植体，通过外植体消毒、诱导培养、丛生芽增殖、不定根发生、炼苗移栽等过程获得了杏仁树离体再植株，建立杏仁树组织培养快速繁殖技术体系，不仅能有效地克服杏仁树传统育苗中的一些缺缺陷，而且对繁育出的无性系苗木在保持母本的优良性状起到一定的作用，有利于杏仁树优良无性系苗木的规模化生产。

发明内容

本发明的目的在于提供出一种杏仁树组培快繁方法，本发明以优良无性系嫩枝为外植体，通过外植体消毒、诱导培养、丛生芽增殖、不定根发生、炼苗移栽等过程获得了杏仁离体再植株，建立杏仁树组织培养快速繁殖技术体系，从而实现了本发明的目的。

本发明的一种杏仁树组培快繁方法，包括以下的步骤：

步骤1，外植体采集及消毒：采取杏仁树桩基部形态表征一致的当年生萌动状态的饱满嫩枝作为外植体，在流水下冲洗 4h，浸泡于3%～5%洗衣粉溶液12分钟，用软毛刷3%～5%洗衣粉溶液轻轻刷洗材料，再用自来水以滴水的形式冲洗90min，用蒸馏水冲洗6次，于超净工作台中以75%乙醇溶液浸泡60s，无菌水冲洗6次，再用含有0.08%吐温-20的0.8%升汞溶液消毒20min，无菌水冲洗8次后用无菌滤纸吸干表面的水分备用;

步骤2，诱导培养：将经步骤（1）处理后的嫩枝剪成约2cm的茎段并接种到诱导培养基进行丛生芽诱导培养,接种后置于每天光照16小时，光照强度为2500lx，置于培养温度为28℃，空气相对湿度为75%的条件下培养32天后统计诱导情况; 诱导培养基为：MS+1.3mg/LNAA+8.3mg/L 6-BA+3.3mg/L KT+1.8g/L AC+43g/L蔗糖+7.3g/L琼脂，pH为5.8；

步骤3，丛生芽增殖：将步骤（2）诱导培养得到丛生芽接种到增殖培养基进行不定芽增殖培养,接种后置于每天光照16小时，光照强度为2500lx，置于培养温度为25℃，空气相对湿度为75%～80%的条件下培养42天后统计发芽数; 增殖培养基为：MS+0.8mg/L 2,4-D+5.3mg/L 6-BA+1.3mg/L NAA+1.8g/L AC+43g/L蔗糖+7.3g/L琼脂，pH为5.8；