[发明专利]测定植物样品中羟基多溴联苯醚的方法

权利要求书

1.测定植物样品中羟基多溴联苯醚的方法，其特征在于，包括以下步骤：

提取：将经过冷冻干燥后的植物样品剪碎，加入37wt％的HCl溶液和异丙醇混匀，再加入正己烷-MTBE混合溶液A，超声震荡24h，离心，移出一次提取有机相，沉淀重复前述所有操作，合并两次一次提取有机相得到粗提取液；

二次提取：将粗提取液氮吹吹干后，溶解于正己烷中，加入NaOH溶液萃取，分离得到二次提取有机相和水相，水相中加入正己烷再次萃取水相，再加入HCl溶液，并用正己烷-MTBE混合溶液B提取三次后，合并所有二次提取有机相，得到提取液；

叶绿素去除：向得到的提取液中加入选择吸附剂超声震荡30min后，静置24h，过滤，得到粗提纯液，所述选择吸附剂是以磁性纳米粒子为核心，β-环糊精为单体，血红素为模板分子的磁性分子印迹材料，所述磁性纳米粒子以多孔磁性四氧化三铁为核心，外包覆了二氧化硅/聚氯甲基苯乙烯复合保护层的球形粒子，所述保护层表面形成若干针状凸起；

提纯：将粗提纯液过弗罗里硅土柱，用二氯甲烷-正己烷-甲醇混合溶液预淋洗，再用二氯甲烷-正己烷-甲醇混合溶液洗脱后，得到的洗脱液即为提纯液；

分析：将提纯液经氮吹吹干后定容，过0.22μm滤膜后进行超高效液相色谱–电喷雾离子源–串联三重四级杆质谱仪分析；

所述选择吸附剂的制备方法包括以下步骤：

多孔磁性四氧化三铁的制备：在氮气保护下，取20g 1.0mmol/g的FeSO4·7H2O和40g2.0mmol/g的FeSO4·6H2O加入1000mL乙二醇中，搅拌至固体溶解后，加入100g十二烷胺，在300rpm、25℃的条件下搅拌10min，加入20g醋酸铵，继续搅拌30min，然后继续搅拌加入15g柠檬酸钠，于500rpm的条件下搅拌至悬浮液变成均匀溶液，将其置于不锈钢反应釜中，将反应釜放置在烘箱中加热至200℃，并保温10h，之后降温到室温，然后以10000r/min的速度离心5min，以乙醇和去离子水洗涤，在真空度为-0.06MPa，温度为60℃的条件下真空干燥，得到多孔磁性四氧化三铁；

包覆：取60g多孔磁性四氧化三铁置于1000mL甲醇溶液中，再加入180g针状的纳米碳酸钡粉末，搅拌12h后，继续于频率30kHz、功率100W条件下超声波填充15min，使针状的纳米碳酸钡插接到多孔磁性纳米四氧化三铁粒子的孔隙中，填充完成后，然后在外加磁场作用下分离沉淀，并对分离出来的沉淀用乙醇进行洗涤后，将其分散于2000mL乙醇溶液中，搅拌，然后加入500mL正硅酸乙酯，继续搅拌1h后，缓慢滴加1000mL 25％的氨水溶液，继续搅拌反应24h后，在外加磁场的作用下再次分离沉淀，对分离得到的沉淀进行洗涤后，将其分散到1000mL甲苯溶液中，再加入300mL对氯甲基苯乙烯和20g偶氮二异丁基，水浴加热至70℃，于17rpm搅拌反应13h，反应完成后，冷却到室温，加入500mL甲醇溶液，在冰浴下搅拌1-2h，冷却完成后在外加磁场的作用下再次分离沉淀，对分离得到的沉淀以甲醇和去离子水多次洗涤后，在真空度为-0.06MPa，温度为70℃的条件下真空干燥，得到磁性纳米粒子；

修饰：取60g磁性纳米粒子加入1500mL 0.1mol/L的HCl溶液中，于频率25kHz、功率100W条件下超声振荡分散10min，然后经外磁场分离、去离子水洗涤后分散于乙醇-去离子水-浓氨水的混合溶液中，然后加入240gβ-环糊精，以100rpm的搅拌速度，在室温下反应6h，离心、洗涤，在真空度为-0.06MPa，温度为65℃的条件下真空干燥之后得到以β-环糊精修饰的磁性纳米粒子；

分子印迹处理：取60g血红素溶解于1000mL稀氨水溶液中，再加入5g 3-(2-氨基乙基氨基)丙基三甲氧基硅烷和5g偶氮二异丁腈，搅拌30min后，得到混合溶液，再将以β-环糊精修饰的磁性纳米粒子分散于1000mL甲醇溶液中，随后加入到所述混合溶液中，继续搅拌，于70℃下反应18h后，分离；

洗脱：将经分子印迹处理步骤得到的固体用去离子水和甲醇分别洗涤，直至洗脱液的PH＝6-7,真空干燥后得到选择吸附剂。

2.根据权利要求1所述的测定植物样品中羟基多溴联苯醚的方法，其特征在于，所述提取步骤中，HCl溶液和异丙醇的体积比为1:5，所述正己烷-MTBE混合溶液A中正己烷与MTBE的体积比为1:1。