[发明专利]一种肠二醇和/或肠内酯的生物转化方法

说明书

本发明一种肠二醇和/或肠内酯的生物转化方法，属于原料药生产技术领域。本发明解决了现有技术生产肠二醇和/或肠内酯成本高、生产条件要求严苛、体外合成肠二醇和肠内酯产量低且不稳定的问题，将含有木脂素前体的植物资源按一定添加量混入家畜类哺乳动物的日粮制得混合日粮，用混合日粮以常规方式饲养家畜类哺乳动物，采集所述家畜类哺乳动物的粪便并从粪便中提取肠二醇和/或肠内酯。本发明通过家畜类哺乳动物体内微生物将木脂素前体转化为肠二醇和/或肠内酯，转化方法和提取方法简单高效，无需建立和控制苛刻的细菌体外厌氧培养条件，生产成本低，得到的肠二醇和肠内酯活性稳定，产量高，且产量稳定，成品纯度高。

技术领域

本发明属于原料药生产技术领域，尤其涉及一种肠二醇和/或肠内酯的生物转化方法。

背景技术

木脂素肠二醇(enterodiol,END)与肠内酯(enterolactone,ENL)具有类雌激素和抗雌激素样作用，可防治更年期综合征、骨质疏松、心血管疾病、高血脂症、乳腺癌、子宫癌、结肠癌、前列腺癌等疾病，具有重要的药用研发价值，应用前景可观。

肠二醇和肠内酯可以通过化学方法合成，但化学合成存在效率低及合成工艺成本高、污染环境的缺点，无法实际应用于肠二醇和肠内酯的原料药生产。

公开号为CN1999754A的发明专利申请公开了一种利用生物转化法体外合成木脂素类植物激素-肠二醇的方法，以代谢4,4′-二羟基肠二醇为底物，在厌氧条件下以人的肠道细菌在体外生物合成肠二醇。该方法底物原料成本高，厌氧培养条件严苛，且仅属于小试阶段，并没有公开其生物转化法进行扩大工业化生产后能稳定生产出肠二醇的条件。

公开号为CN101560541A的发明专利申请公开了一种以亚麻籽粕、燕麦麸等植物资源为底物，利用肠道细菌在体外进行厌氧培养制备肠二醇和/或肠内酯的方法。该方法需要从人或小鼠等哺乳动物的粪便或肠液中提取生产菌，并在体外进行增殖培养，由于生产菌对厌氧环境要求严格，体外培养极易造成细菌活性不稳定，使肠二醇、肠内酯的产量产生波动，难以控制，因此无法满足大量生产的需求。

由于上述现有生产方法的诸多不利因素，肠二醇和肠内酯难以得到足够产量，无法实现真正的临床应用。

发明内容

为解决现有技术生产成本高、生产条件要求严苛、体外合成肠二醇和肠内酯产量低且不稳定的问题，本发明提供了一种肠二醇和/或肠内酯的生物转化方法。

本发明的技术方案：

一种肠二醇和/或肠内酯的生物转化方法，将含有木脂素前体的植物资源按一定添加量混入家畜类哺乳动物的日粮制得混合日粮，用混合日粮以常规方式饲养家畜类哺乳动物，采集所述家畜类哺乳动物的粪便并从粪便中提取肠二醇和/或肠内酯。

进一步的，所述含有木脂素前体的植物资源包括亚麻籽粕、芝麻籽粕、油菜籽粕、黑麦麸、黑芝麻、芝麻、油菜籽、小麦麸、大麦麸、玉米麸、燕麦麸、牛蒡子粕和海藻中的一种或几种的组合。

进一步的，所述家畜类哺乳动物包括猪、牛、羊、马、兔、犬。

进一步的，所述含有木脂素前体的植物资源的添加量为混合日粮质量的16～60％。

进一步的，提取肠二醇时，采集家畜类哺乳动物在食用所述混合日粮第2天及以后产生的粪便；提取肠内酯时，采集家畜类哺乳动物食用所述混合日粮第25天及以后产生粪便。

进一步的，所述从家畜类哺乳动物粪便中提取肠二醇和/或肠内酯的方法为：将粪便与无菌水充分混合，静置沉淀后取上清液进行离心处理，取离心上清液与质量浓度为95％的乙醇混合得到上样液，上样至大孔树脂色谱柱，以一定质量浓度的乙醇水溶液进行洗脱，收集含有肠二醇和/或肠内酯的洗脱液进行旋蒸浓缩，得到肠二醇和/或肠内酯。